生物选修一2-2 土壤中分解尿素的细菌的分离和计数.ppt

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生物选修一2-2 土壤中分解尿素的细菌的分离和计数

课题2 土壤中分解尿素的细菌的 分离与计数; 自然界筛选 寻找目的菌种时要根据它对________的要求,到______的环境中去寻找。 ;课题背景               ;(一)筛选菌株 KH2PO4 1.4g NaHPO4 2.1g MgSO4 H2O 0.2g 葡萄糖 10.0g 尿素 1.0g 琼脂 15.0g 将上述物质溶解后,用蒸馏水定容到1000mL。 ;(二)统计菌落数目: 1、活体计数法(稀释涂布平板) (1)操作方法: 稀释涂布平板→统计菌落数 (2)原理: 当稀释度足够时,生长的菌落,1个菌落→1个活菌。 (3)统计原则 ①选 30~300 个菌落的平板统计 ②每个稀释度取3个平板取其平均值; 关注菌落的形态、大小、边缘、突起、颜色、 质地等等,都是区分细菌的重要手段。 ;2、显微镜直接计数;; 例:两位同学用稀释涂布平板法测定同 一土壤样品中的细菌数。从对应稀释倍数为 106的培养基中,得到以下两种统计结果。 1、甲同学在该浓度下涂布了一个平板,统计的菌落数为230。 2、乙同学在该浓度下涂布了A、B、C三个平板,统计的菌落数分别为21、212、256,该同学以这三个平板上菌落数的平均值163作为统计结果。 你认为这两位同学的作法正确吗?如果有问题,错在哪?;(二)统计菌落数目 1、活菌计数法 (4)统计结果:统计的菌落数往往比活菌的实际数目低,因此统计结果一般用菌落数表示。 每克样品中的菌株数=(C/V)* M C:某一稀释度下平板上生长的平均菌落数; V:所用稀释液的体积;M:稀释倍数。;1.某同学在稀释倍数为106的培养基中测得平板上菌落数的平均值为234,涂布平板时所用稀释液的体积为0.1mL,那么每克样品中的菌落数是  (??? ) A.2.34×108    B.2.34×109???????? C.234       D.23.4 ;(三)设置对照 1、设置对照的目的: 排除实验组中非测试因素对实验结果的影响,提高实验结果的可信度。 对照实验是指除了 被测试 的条件外,其他条件都 相同 的实验。;小结:通过这个事例可以看出,实验结果要有说服力,对照的设置是必不可少的。;2.1 根据图示2-7填写以下实验流程: ; (六)鉴定: 鉴别培养基:不影响微生物的生存 酚红培养基: 原理:脲酶催化尿素分解成氨→培养基碱性增强→ 酚红变红→脲酶阳性

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