1.1《DNA重组技术的基本工具》课件(选修3).ppt

专题1 基因工程;专题1;专题1 基因工程;烟草;每100kg 猪或牛的胰腺中仅可提取4~5g。; 基因工程：又叫DNA重组技术。通俗的说，就是按照人们的意愿，把一种生物的某种基因提取出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里，定向地改造生物的遗传特性。;基础理论和技术的发展催生了基因工程;科技探索之路;沃森、克里克提出DNA的双螺旋结构模型。;梅塞尔松、斯塔尔证明DNA的半保留复制;克里克等提出中心法则;科技探索之路;技术发明使基因工程的实施成为可能;基因工程的别名;问题探讨：;基因工程培育抗虫棉的简要过程：;基因工程培育抗虫棉的关键步骤：;解决培育抗虫棉的关键步骤需要哪些工具？;思考Q:;寻根问底;思考与探究 P7 （2）;⒈主要来源： ⒉种类与命名： ⒊作用特点（特异性） 4.限制酶识别序列 5.作用结果：;⒉种类与命名：; T;G A A T T C;EcoR Ⅰ;EcoRⅠ ;Sma Ⅰ; 限制酶所识别的序列，无论是6个碱基还是4个碱基，都可以找到一条中心轴线（如图），中轴线两侧的双链DNA上的碱基是反向、对称、重复排列的。; 限制酶存在于原核细胞中的作用是什么？为什么限制酶不剪切细菌本身的DNA？;实例：;Q:要想获得某个特定性状的基因必须要用限制酶切几个切口？可产生几个黏性(平)末端？;1、种类： 2、作用部位：;③类型：; 可把黏性末端之间的缝隙“缝合”起来，;T4 DNA连接酶还可把平末端之间的缝隙“缝合”起来，但效率较低;;Q:外源基因(如抗虫基因)怎样才能导入受体细胞(如棉花细胞)？; 最常用的质粒是大肠杆菌的质粒:常含有抗药基因如:四环素的标记基因。(质粒的存在与否对受体细胞生存没有决定性作用，但复制只能在受体细胞内完成);1.假如目的基因导入受体细胞后不能复制将怎样？ 2.作为载体没有切割位点将怎样？ 3.目的基因是否进入受体细胞，你如何去察觉？ 4.如果载体对受体细胞有害将怎样？ ;作为运载体必须具备的条件;质粒的特点：;注意：这两条DNA分子的碱基对不是随意乱写的。 一、每个DNA分子上的两条链上的碱基要互补配对； 二、每个DNA分子中每条链都存在一个G-A-A-T-T-C的碱基序列，也就是说是EcoRI限制酶的识别序列，并存在G-A的切割位点。;小结：;1、关于限制酶的说法中，正确的是（ ） A、限制酶是一种酶，只识别GAATTC碱基序 列 B、EcoRI切割的是G—A之间的氢键 C．限制酶一般不切割自身的DNA分子，只 切割外源DNA D．限制酶只存在于原核生物中;2、DNA连接酶催化的反应是( ) A．DNA复制时母链与子链之间形成氢键 B．黏性末端碱基之间形成氢键 C．两个DNA片段黏性末端之间的缝隙的连接 D．A、B、C都不正确;3、作为基因的运输工具——载体，必须具备的条件及理由是( ) A、能够在宿主细胞中稳定地保存下来并大量复制，以便提供大量的目的基因 B、具有多个限制酶切点，以便于目的基因的表达 C．具有某些标记基因，以便为目的基因的表达提供条件 D、能够在宿主细胞中复制并稳定保存，以便于进行筛选;4、质粒是基因工程最常见的载体，它的 主要特点是( ) ①能自主复制 ②不能自主复制 ③结构很小 ④是蛋白质 ⑤是环状RNA ⑥是环状DNA ⑦能“友好”地“借居” A、①③⑤⑦ B、②④⑥ C．①③⑥⑦ D．②③⑥⑦;5、在受体细胞中能检测出目的基因是因为( ) A、目的基因上有标记 B、质粒具有某些标记基因 C、重组质粒能够复制 D．???上都不正确;6、关于质粒的叙述正确的是( ) A、质粒是能够自我复制的环状DNA分子 B、质粒是唯一的载体 C、重组质粒是目的基因 D、质粒可在宿主外单独复制;7、基因工程中可用作载体的是( ) ①质粒 ②噬菌体 ③病毒 ④动物细胞核 A、①②③ B、①②④ C．②③④ D、①③④;8、下列关于基因工程中所选用的质粒 的说法，错误的是( ) A、不能没有标记基因 B、是小型链状的DNA分子 C、能够自我复制 D．可与目的基因重组;9、下列黏性末端属于同一限制酶切割而 成的是( );10、要使目的基因与对应的载体重组，所需的两种酶是( ) (1)限制酶 (2)连接酶 (3)解旋酶 (4)还原酶 A、(1)(2)(3) B、(1)(2)(4) C、(1)(2) D、(1)