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免疫学原理及检测;主要内容;免 疫 学;免疫学反应;抗原(Antigen);抗体(Antibody);免疫球蛋白分类;IgG抗体的结构及与抗原的反应;血清学反应的一般特点;最适比例示意图; 4、血清学反应大体分为两个阶段进行，但其间无严格界限。第一阶段为抗原抗体特异性结合阶段，反应速度很快，只需几秒至几分钟反应即可完毕，但不出现肉眼可见现象。第二阶段为抗原抗体反应的可见阶段，表现为凝集、沉淀、补体结合反应等。反应速度慢，需几分、几十分以至更长时间。;酶联免疫吸附试验 enzyme linked immuno-sorbent assay ELISA;ELISA方法的技术根据;ELISA 方法的种类;双抗体夹心 ELISA 法示意图;;影响因素;试剂因素;标本因素(外源性干扰);标本因素(内源必干扰);操作时影响因素;中山生物产品;乙型肝炎病毒血清标志物检测;★ 常用ELISA法检测。 ★ 目前HBsAg诊断试剂质量较高，灵敏度可达 0.2ng/L。从全国室间质控评价结果显示，阳  性标本率达到或超过98％。 ★ HBsAg滴度越高，HBeAg、HBV DNA阳性的可能性越大。 ★ 血液与肝组织的HBsAg含量并不完全相关。;为什么血清HBsAg阴性不能排除HBV感染？ ★ 检测试剂不够敏感。 ★ S基因变异（抗原性发生改变）。 ★ X基因变异（转录受抑制）。 ★ 重叠HCV感染（干扰HBsAg合成）。;如何诊断血清HBsAg阴性的HBV感染？ ★ 提高检测敏感性 ★ 采用针对变异抗原的检测试剂 ★ HBV DNA的检测 ★ 组织中标志物的检测;阳性就万无一失了吗？ 低滴度应注意假阳性 单一HBsAb阳性HBV DNA检出率0-11.8%： ★ 先后感染了不同的HBV亚型 ★ S基因变异 ★ X基因变异;HBsAb阳性HBV DNA阴性 并不排除肝细胞内HBV的存在 ; ★ 可出现在HBV感染的恢复期，此时HBsAg未  消失，HBsAb已产生，大部分归功于检测敏 感性的提高。 ★ S基因发生变异，野生株HBsAb不能将其清 除； ★ HBsAb阳性者感染了不同亚型HBV或免疫逃  避株。;★ 是重要的免疫耐受因子，大部分情况下其存  在表示患者处于高感染低应答期。 ★ HBeAg与HBV DNA有良好的相关性。 ★ 阳性标本检出率90％左右。;HBeAg与HBeAb;HBeAg与HBeAb共存 ★ 血清转换过程中。 ★ 检测敏感性提高。 ★ 野生株与变异株同时存在。;HBcAb;乙型肝炎病毒各项标志物检测的临床意义; 乙型肝炎表面抗原 (HBsAg) ; 乙型肝炎e 抗原(HBeAg）; 乙型肝炎核心抗体 (HBcAb) ;临床二对半检测常见模式; HbsAg -HBs HBeAg -HBe -HBc 1 ＋　 －　　＋　　 －　 ＋ 2 ＋ 　 －　　－ 　　＋　 ＋ 3 ＋ 　 －　 － 　 ＋ 　 － 4 － 　 －　　－　　 ＋　 ＋ 5 ＋ 　 －　　－　　 － 　＋ 6 －　 －　　－　　 －　 ＋ 7 － 　 ＋　　－　　 ＋　 ＋ 8 －　 ＋　　－　　 － 　 ＋ －　 ＋　　－　　 － 　 － 10 －　 － 　　－　 －　 － ; ？; HBV DNA检测的临床意义;（4） 对HBV-M起补充作用： ① HBeAg(﹣)/ HBeAb(﹢)乙型肝炎 （前C区变异） ② HBsAg(﹣)乙型肝炎 （S区变异） ③ 低水平感染 单项抗HBc(﹢)乙型肝炎;HBV DNA检测的临床意义;HBV DNA检测的临床意义;为什么建议每个病人都要进行HBV DNA检测？;HBsAg和HBeAg均阳性而HBV DNA阴性 可能的原因： 干扰素或拉米夫定等治疗后病毒复制受抑制。 PCR所用引物相应的DNA序列发生突变，此引物与突变DNA不能配对结合。 病毒DNA整合于宿主肝细胞染色体而血中游离HBV DNA很少或缺乏。;丙型肝炎;HCV RNA HCV RNA阳性是病毒感染和复制的直接标志。HCV RNA亦可定量，定量测定有助于了解病毒复制程度、抗病毒治疗的选