微生物遗传学PPT-遗传的物质基础.pptVIP

第二章 微生物的遗传物质;一、DNA是遗传物质;1.DNA含量恒定性。配子DNA=1/2体细胞，多倍体DNA含量倍增，但细胞内而蛋白质含量是不恒定的。 2.DNA代谢稳定性。 3.DNA是所有生物染色体所共有的。 4.UV激发最有效波长是2600Ao，与DNA 所吸收的UV光谱是一致的。;（二）DNA作为主要遗传物质的直接证据;推测: 被加热杀死的S Ⅲ型肺炎双球菌必然含有某种促成以上结果的活性物质;1944年Avery等从S抽提液中部分纯化了此转化因子，而且此物质不受蛋白酶、多糖酶和核糖核酶（Rnase）的影响，只能为DNA酶所破坏，证明它是DNA。利用此DNA样品加入R型细菌的培养物中，得到菌落中含有了S型球菌。这个实验证明了使肺炎球菌的遗传性发生改变的转化因子是DNA，而不是蛋白质。这一发现极大地推动了对核酸的结构和功能的研究。 ;2. 噬菌体侵染与繁殖 实验： （1）用P32标记T2噬菌体的DNA S35标记T2噬菌体的蛋白质 （2）分别感染大肠杆菌 （3）10min用搅拌器甩掉附着于细胞外面的噬菌体 外壳, 发现 a. 全部放射性活动(P32)见于细菌内→子代 b. 放射性(S35)大部分见于被甩掉的外壳中→子代 DNA是遗传物质 ;噬菌体侵染实验;遗传物质必须具有以下特性： （1）贮存并表达遗传物质； （2）能把遗传信息传给子代； （3）物理和化学性质稳定； （4）有遗传变化的能力。;二、RNA是遗传物质;三、存在核酸之外的其它遗传物质 ; 朊病毒特性：比已知的最小的常规病毒还小得多（约30～50nm）。电镜下观察不到病毒粒子的结构，经负染后才见到聚集而成的棒状体，其大小约为10～250 x 100～200纳米，且不呈现免疫效应，不诱发干扰素产生，也不受干扰作用。 滤过性 致病性 传染性 宿主范围的特异性：是羊搔痒病的致病因子，它导致山羊和绵羊的退行性神经疾病的原因。这种病与影响人脑功能的库鲁病（新几内亚震颤病）和克－雅氏病及疯牛病类似。; 朊病毒是一个36kDa的疏水性的糖蛋白，称为朊病毒蛋白（prion protein, PrP）。PrP由宿主细胞核基因PRNP编码。在正常动物的脑中也有表达。 ;有两种???式： PrPc和 PrPsc ? 正常的脑组织中发现的产物是PrPc可被蛋白酶完全降解；而PrPsc只存在被感染的脑组织，对蛋白酶的降解有较强的抗性，只能部分被降解。 ? PrPc是个可溶性的蛋白质，而PrPsc很难溶解。 ? 两种蛋白质具有相同的一级结构，但二级结构却十分不同，PrPc的α螺旋的含量约为40％，几乎没有β片层结构，相反PrPsc则含有高达50％的β片层结构，而α螺旋的含量仅为20％。因而二者之间结构上的差异可能导致对蛋白酶抗性的不同。 ;PrPc转化为PrPsc的机制的不同模式： ; 构象转化模式（Conformational model）模板辅助模式 （template-assisted model）：PrPsc 形式比PrPc的稳定，但由PrPc到 PrPsc的转化在动力学上是不利的。PrPsc可以催化PrPc分子结构的变化。它可结合并稳定PrPc到 PrPsc的中间体，通过增加不稳定的中间体的数量或提高中间体自发地转化为PrPsc地速率，促进生成更多稳定地PrPsc。模板辅助模式类似于一些蛋白质动力学控制的构型转化，如流感血球凝集素、枯草杆菌蛋白酶等。 ; 成核聚合模式（nucleation-polymerization model）：PrPsc的生成是一个依赖于晶核生成的聚合过程，在事先没有聚集体存在时，PrPc与PrPsc之间的转化是可逆的，但PrPsc没有PrPc稳定，PrPsc聚集体可与PrPc单体结合并使之稳定。感染缓慢的发生，如同结晶过程中引入晶种并生成晶体一样。成核聚合模型类似于微管蛋白的聚集、晶体的生成、镰刀型血红蛋白的形成、病毒衣壳粒的组装、细菌鞭毛的聚集等生物过程。;推荐的相关论著： Satpute-Krishnan P, Serio TR. Prion protein remodelling confers an immediate phenotypic switch. Nature. 2005 ;437(7056):262-5. Silveira JR, Raymond GJ, Hughson AG, Race RE, Sim V