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实验九 ?观察细胞的有丝分裂 一．实验目的： 1．制作洋葱根尖细胞有丝分裂装片 2．观察植物细胞有丝分裂的过程，识别有丝分裂的不同时期，比较细胞周期不同时期的时间长短。 3．绘制植物细胞有丝分裂简图。 二．实验原理： 1．在高等植物体内，有丝分裂常见于根尖、芽尖等分生区细胞。由于各个细胞的分裂是独立进行的，因此在同一分生组织中可以看到处于不同分裂时期的细胞。 2．染色体容易被碱性染料（如龙胆紫溶液）着色，通过在高倍显微镜下观察各个时期细胞内染色体（或染色质）的存在状态，就可判断这些细胞处于有丝分裂的哪个时期，进而认识有丝分裂的完整过程。 三．实验材料：洋葱（可用葱、蒜代替）。因为根尖生长点属于分生组织，细胞分裂能力强，易观察到有丝分裂各个时期的细胞。 四．实验步骤： 步?骤注 意 问 题分 析一、根尖的培养 实验前3~4天，让洋葱放在广口瓶上，底部接触清水。根长约5cm时可用。? 置于温暖处，常换水。? 因为细胞分裂和生长需要水分、适宜的温度和氧气。二、装片的制作 （解离→漂洗→染色→制片） 1．解离：上午10时至下午2时，剪取洋葱根尖2~3mm，立即放入盛有质量分数为15%的盐酸和体积分数为95%的酒精溶液的混合液（1：1）的玻璃皿中，室温下解离3~5min。? 解离时间要保证，细胞才能分散开来。 ? 解离时间也不宜过长。? 目的：溶解细胞间质，使组织中的细胞相互分离开来。此时，细胞已被盐酸杀死。 否则，根尖过于酥软，无法取出。2．漂洗：待根尖酥软后，用镊子取出，放入盛有清水的玻璃皿中漂洗约10 min。漂洗要充分，可换水1~2次。 ?目的：洗去解离液，便于染色。 ? ?3．染色：把洋葱根尖放进盛有质量浓度为0.01g/mL或0.02g/mL的龙胆紫溶液的玻璃皿中染色3~5min。染色时间不宜过长，否则显微镜下一片紫色，无法观察。龙胆紫等为碱性染料，可使染色体着色。 醋酸洋红溶液也能使染色体着色4．制片：用镊子将这段洋葱根尖取出来，放在载玻片上，加一滴清水，并用镊子尖把洋葱根尖弄碎，盖上盖玻片，在盖玻片上再加一片载玻片。然后，用拇指轻轻地压载玻片，使细胞分散开来。要弄碎根尖，再垂直向下均匀用力压片，不可移动盖玻片，目的：使细胞分散，避免细胞重叠，便于观察。做得成功的装片，标本被压成云雾状。三、观察 1．低倍镜观察：把装片放在低倍镜 下，慢慢移动装片，找到分生区细胞。 ? 2．高倍镜观察：移走低倍镜，换上高倍镜，用细准焦螺旋和反光镜把视野调整清晰，仔细观察，找出处于细胞分裂期中期的细胞，再找出前期、后期、末期的细胞。? 一定要找到分生区。 ? ? 在一个视野里，往往不容易找全有丝分裂过程中各个时期的细胞。如果是这样，可以慢慢地移动装片，从邻近的分生区细胞中寻找。? 分生区细胞特点是：细胞呈正方形，排列紧密，有的细胞正处于分裂期。讨论：制作好洋葱根尖有丝分裂装片的关键是什么？ 答：制作好洋葱根尖有丝分裂装片的关键有以下几点：（1）剪取洋葱根尖材料时，应该在洋葱根尖细胞一天之中分裂最活跃的时间；（2）解离时，要将根尖细胞杀死，细胞间质被溶解，使细胞容易分离；（3）压片时，用力的大小要适当，要使根尖被压平，细胞分散开。