建立血浆中花生四烯酸19种代谢物同时测定的定量分析方法.PDFVIP

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建立血浆中花生四烯酸19种代谢物同时测定的定量分析方法

[ 应用纪要] 使用ACQUITY UPLC I-Class Xevo TQ-S液质联用系统 建立血浆中花生四烯酸19种代谢物同时测定的定量分析方法 万咪咪 范自全 沃特世科技(上海)有限公司 应用优势 前言 ■ ?液相分离结合 ? 实 UPLC CORTECS UPLC C18 花生四烯酸(Arachidonic acid,AA),是ω-6系列人体重要的多不饱和脂 心核颗粒色谱柱可显著改善多组同系 肪酸。它是人体一种必需脂肪酸。AA在生物体内主要以磷脂的形式 物的分离和峰形,提高检测灵敏度 存在于机体各个组织的细胞膜上,正常生理状态下游离的AA浓度很 ■ Xevo? TQ-S具有超高灵敏度,可用于花生 低,但当细胞膜受到各种刺激时,AA便从细胞膜的磷脂池中释放出 四烯酸体内19种代谢物同时测定 来,在酶的作用下,转变为具有生物活性的代谢物。这一过程主要 有三类酶参与:环加氧酶(COX),脂加氧酶(LOX)和CYP450单氧化酶。 ■ 使用Oasis? ìElution 96孔板可浓缩样品, 减少挥发过程待测物的损失 AA体内代谢物具有很强的生物活性,是细胞调节的重要物质,同时 AA代谢物之间的平衡失调与多种疾病相关。为了能够深入理解这些 化合物对人类健康和生理与病理过程的影响,需要对其准确定量。 然而这些代谢物体内存在浓度很低,稳定性差,其形成依赖于体内 前体AA的释放,而且存在大量的同系物,分子量相同,结构也相似, 给分析带来了很大的挑战。 本文采用ACQUITY UPLC I-Class Xevo TQ-S液质联用系统成功建立了高通 量、灵敏的分析方法用于同时测定人血浆中19种AA体内代谢物,为 其临床检测提供了有利的工具。 沃特世解决方案 ACQUITY UPLC? I-Class系统 Xevo TQ-S系统 CORTECS C18色谱柱 Oasis MAX 96孔ìElution板 关键词 UPLC液相分离,Xevo TQ-S, Oasis样品前处理, 花生四烯酸代谢物同分异构体 1 [ 应用纪要] 实验 结果与讨论 液相方法 本实验研究的19种AA体内代谢物存在多组分子量相同,结构类似的 系统: ACQUITY UPLC I-Class 同系物,其产生的碎片也一致,所以寻找稳定且无干扰的碎片的同时 也需要优化色谱条件达到最佳分离,以避免相互之间的干扰。 色谱柱: ACQUITY UPLC CORTECS C18, 1.6 ìm, 2.1×100 mm

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