第五章 基因工程及其在食品工业中的应用-2013.ppt

食品生物技术;第五章 基因工程及其在食品工业中的应用The application of Genetic Engineering in Food Industry;主要内容;第一节 基因工程概述;（一）基因工程的概念： (Genetic engineering) 用酶学方法，将异源基因与载体DNA在体外进行重组，将形成的重组子转入受体细胞，使异源基因在其中复制表达，从而改变生物特性，大量生产出人类所需要的产物的高新技术。 ; 食品基因工程： 利用基因工程的技术和手段，在分子水平上定向重组遗传物质，以改良食品的品质和性状，提高食品的营养价值、贮藏加工性状以及感官性状的技术。;2. 重组体的制备;将重组体（载体）转入适当的受体细胞中。;外源DNA在寄主细胞内可大量扩增，和高水平表达。;（四）基因工程的发展概况;一、基因工程诞生的理论基础;1953年James D. Watson和Francis H. C. Crick揭示了DNA分子的双螺旋结构和半保留复制机制。;1957年Crick又提出了遗传信息传递的“中心法则” ;二、基因工程诞生的技术突破;;5. 琼脂糖凝胶电泳;三、基因工程的诞生;2. Boyer-Cohen实验;;; 1986年，美国和英国科学家首次进行了抗除草剂转基因烟草的田间实验。 此后，基因工程技术迅猛发展，已经在农业、医药、食品、环保等领域显示出巨大的应用价值。 ; 2012年全球的转基因作物种植面积有1.703亿公顷，比2011年增长6%。 2012年美国仍是全球领先的转基因作物生产者，种植面积达6900万公顷，主要转基因作物的平均种植率约为90%。（中国第六） 全世界转基因作物按种植面积排序分别为玉米、大豆、棉花、油菜籽。 ; 我国的农业基因工程研究于20世纪80年代初期开始启动，并于20世纪80年代中期开始将生物技术列入国家“863”高科技发展计划。 我国正在研究的转基因植物种类达47种以上，涉及各类基因100多个。 目前我国被批准进行商品化生产的6种转基因植物：转基因耐贮藏的番茄、转查尔酮合成酶基因矮牵牛、抗病毒甜椒、抗病毒番茄、抗虫棉花和保龄棉等。;世界各国转基因作物大田释放情况;中国已经批准进入大田的转基因植物;;;（五）基因工程的安全性;制造带有抗生素抗性基因或有产生病毒能力的基因的新型微生物有可能在人类或其它生物体内传播。;将肿瘤病毒或其它动物病毒的DNA引入细菌有可能扩大癌症的发生范围。;1. 公众的担忧;1974年美国国立卫生研究院（NIH）考虑到重组DNA的潜在危险，提请Paul Berg博士组成一个重组DNA咨询委员会。;3.制定安全规则;;全负压的实验室，同时装备安全操作柜。;在自然环境中无法存活。;（3） 载体的安全;主要内容; 第二节 工具酶 The Enzyme of Tools ;是一类专一性很强的核酸内切酶。 识别并切割特异的双链DNA序列的一种内切核酸酶。;(一）限制性内切酶的种类：;(二）限制性内切酶命名原则：;（三）限制性内切酶的特性:;2、识别序列皆具有回文结构，也就是在切割部位，一条链正向读的碱基顺序与另一条链反向读的顺序完全一致 。;（三）限制性内切酶的特性: ;例如：EcoR I的识别序列及作用点： ↓ 5’----G A A T T C------3’ 3’----C T T A A G------5’ ↑ ↓ EcoR I 粘性末端 5’-----G A A T T C-----3’ 3’-----C T T A A G-----5’ 粘性末端;（2） 平整末端(flush ends)：在同一位点平齐切割DNA两条链而形成的双链末端，（或者说两条链的切点是平的）称为平整末端。;（三）限制性内切酶的特性: ;二 、DNA连接酶（Ligases） ;（四）应用：连接各种粘性和平整末端 ;三 、DNA聚合酶?（DNA polymerase） ;四、多聚核甘酸激酶(T4 Polynucleotide Kinase);五、 碱性磷酸酯酶（磷酸单酯酶）（Alkaline Phosphatase）;六、 S1核酸酶：（Nuclease）;七、反向转录酶（R