固相萃取柱的实验方法和技巧.pdf

·天津水产·2010 年 第 4 期 固相萃取柱的实验方法和技巧 陈永平 张素青 李连庆 李春青 ? ， ? 农业部渔业环境及水产品质量监督检验测试中心 天津 300221 为避免样品在上液相色谱、气相色谱、LC-MS-MS、GC-MS 时可能造成色谱柱或源的污 ， ， 染 固相萃取成为去除杂质的必要手段 但经常会遇到柱子的选择、溶剂的选择、操作上的问 ， 题。通常说的过柱应该称作柱层析分离 又称柱色谱。文中以常用的硅胶或氧化铝作固定 ， 相的吸附柱为例 探讨分析了固相萃取柱压、柱尺寸、无水无氧柱、干湿法上样及实验操作时 ， 遇到的问题 总结出固相萃取柱的实验方法和技巧。 1 固相萃取柱的选择与分类 1． 1 柱压力方式选择 ? ， ? ， 柱压力可分为 减压、加压、常压。减压柱能够减少固定相硅胶的使用量 缺点有 第一 大量的空气通过硅胶会使溶剂挥发? 有时在固相萃取柱外面有水汽凝结? ? 第二，可能会造 ? ， ， ， 成易分解物质的损失 第三 抽气泵的使用 会延长过柱萃取时间 增加噪音。 ， 固相萃取柱加压是一种较好的使用方式 特别适用于易分解样品的分离。加压可以增 加淋洗剂的流动速度，减少产品收集时间，缺点是? 第一，减低柱子的塔板数? 第二，压力过 ， ， 大 溶剂流速过快减低分离效果 所以柱加压在普通的有机化合物的分离中较适用。其他条 ， ， ， 件相同时 常压柱效率最高 但耗时 比如天然化合物的分离。 1． 2 固相萃取柱的尺寸选择 ， ， 理想的固相萃取柱类型应该是内径和长度均较大。柱长加大 相应的塔板数则高 柱内 ， ? ? ， 径较大 进样后样品的原点则小 反映在柱子上就是样品层较薄 分离度变大。缺点是采 ， 用内径较大的萃取柱需较多的硅胶和溶剂 增加实验成本。现在常用萃取柱直径与长度比 ， ， 一般在 1∶ 5 ～ 1∶ 10 固定相硅胶量是样品量的 30 ～ 40 倍。萃取柱较短内径较小 相应的塔 板数则低，进样后样品的原点则大? 反映在柱子上就是样品层较厚，样品层在固相萃取柱内 ， ? ， 小于 0． 5cm 各组分较容易完全分离 分离度变小。