22免疫学诊断幻灯片.pptVIP

免疫学诊断与防治;目的要求;免疫学诊断;一、抗原或抗体的检测; 抗原与抗体反应的体系中，若两者的浓度和比例适当，则形成的抗原抗体复合物体积大、数量多，出现肉眼可见的反应。;;抗原抗体反应的影响因素;（二）抗原或抗体的检测方法 1、凝集反应（agglutination reaction） 细菌、细胞等颗粒性抗原或表面包被有抗原的颗粒状物质（如聚苯乙烯乳胶等）与相应的抗体在电解质存在的条件下结合，出现肉眼可见的凝集团现象，称为凝集反应。 ; 直接凝集反应;; 间接凝集反应;载体;;免疫妊娠试验（1）;免疫妊娠试验（2）;2、沉淀反应（Precipitation reaction） 毒素、组织浸液及血清中的蛋白等可溶性抗原与相应抗体反应后，出现肉眼可见的沉淀物，称为沉淀反应 。沉淀反应可在液体中进行，也可以在半固体琼脂凝胶中进行。;沉淀反应包括：;;;;3、免疫标记技术（immunolabeling techniques） 为了提高单纯的抗原和抗体检测的灵敏性，将已知的抗体或抗原标记上示踪物质，通过检测标记物，间接测定抗原抗体复合物。 常用的标记物有酶、荧光素、放射性核素、胶体金及化学发光物质等。;标记物;免疫酶测定法（enzyme immunoassay, EIA） 应用最广泛的方法是酶联免疫吸附试验（enzyme linked immunosorbent assay, ELISA）;;1. Add antigen;免疫荧光技术 荧光素标记的抗体（抗原）与组织或细胞中的相应抗原（抗体）结合，借助于荧光显微镜或流式细胞仪对抗原（抗体）进行鉴定或定位。;;;二、免疫细胞功能的检测;密度梯度离心法: 用淋巴细胞分层液(葡聚糖-泛影葡胺) 除去红细胞、粒细胞,所获细胞称外周血单 个核细胞(PBMC)的方法，其中淋巴细胞90%。 ; 免疫吸附分离法 磁珠分离法 流式细胞术 等等;（二）免疫细胞功能的测定 T细胞功能测定 1、T细胞增殖试验 T细胞表面含有有丝分裂原受体,能接受植物血凝素（PHA）、刀豆蛋白A（ConA）或美州商陆（PWM）等有丝分裂原的刺激，转化成为淋巴母细胞。 （1） 3H-TdR掺入法 （2） 51Cr释放法 ;培养液;靶细胞;2、E花环形成试验（ E Rosette Test ） ;酶联免疫斑点法（Enzyme-Linked Immunospot, ELISPOT);CK抗体包被的反应板;淋巴细胞转化试验（形态学示意图）; B细胞功能测定 1、抗体形成细胞测定：常用溶血空斑试验 ;思考题