第4章-高效液相色谱幻灯片.ppt

第4章 高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography，HPLC) ;4-1 概述;基本理论; 1．HPLC法与经典液相色谱法区别 ;;2．HPLC法与气相色谱法区别;续前;区别三 气相色谱法一般都在较高温度下进行 高效液相色谱法则经常在室温条件下工作 ;4-2 高效液相色谱法固定相;;1 表面多孔型固定相;2 全多孔型固定相 ; ;4-3 高效液相色谱流动相;流动相溶剂的要求（不同的色谱分离类型流动相组成不同）;所谓溶剂的紫外截止波长指当小于截止波长的辐射通过溶剂时，溶剂对此辐射产生强烈吸收，此时溶剂被看作是光学不透明的，它严重干扰组分的吸收测量。;（3）高纯度。由于高效液相灵敏度高，对流动相溶剂的纯度也要求高。不纯的溶剂会引起基线不稳，或产生“伪峰”。痕量杂质的存在，将使截止波长值增加50～100nm。 （4）化学稳定性好。不能选与样品发生反应或聚合的溶剂。 （5）低粘度。若使用高粘度溶剂，势必增高压力，不利于分离。常用的低粘度溶剂有丙酮、乙醇、乙腈等。但粘度过于低的溶剂也不宜采用，例戊烷、乙醚等，它们易在色谱柱或检测器内形成气泡，影响分离. ;4-4 高效液相色谱法的主要类型;（一）液-液分配色谱法（LLPC）;1．液液分配基本理论;（2）固定相;;在液液色谱中为了避免固定液的流失，基本要求是流动相尽可能不与固定相