Logistic方程参数估计和曲线拟合.doc

华南师范大学实验报告 学生姓名 刘璐 学 号 20082501055 专 业 年级、班级 课程名称 实验项目 Logistic方程参数估计和曲线拟合 实验类型 验证 设计 综合 实验时间 2011年 3 月 14 日 实验指导老师 实验评分 Logistic方程参数估计和曲线拟合 实验目的 本实验通过对在5℃马铃薯培养液，22℃马铃薯培养液和22℃蔗糖培养液中酵母菌增长数量的观察，使学生了解在不同温度、不同培养液中酵母菌种群增长的情况以及掌握Logistic方程参数估计和曲线拟合。 实验试剂、材料与器具 1、实验试剂与材料 酵母菌菌液，蒸馏水，去皮马铃薯，葡萄糖，蔗糖 2、实验器具 恒温培养箱、光学显微镜、血球计数板、锥形瓶、量筒、移液管、纱布等 实验步骤 1、配制马铃薯培养液和蔗糖培养液，分装进3个锥形瓶中（2个马铃薯培养液和1个蔗糖培养液），编号A，B，C，高温高压灭菌。 2、分别接种1mL的酵母菌菌液到A，B，C瓶中，并把A，C放置在22℃，B放置在5℃的培养箱中培养。 3、每天定时观测一次，记录酵母菌数量的变化情况，至酵母菌的数目连续3天不变化为止。 4、分析记录的数据，比较在不同温度、不同培养液下酵母菌的种群增长情况。 实验结果与分析 图1 5℃马铃薯培养液下酵母菌种群增长曲线 图2 22℃马铃薯培养液下酵母菌种群增长曲线 图3 22℃蔗糖培养液下酵母菌种群增长曲线 从上述曲线图，可以看出22℃马铃薯培养液为酵母菌增长的最适环境。该曲线（见图2）总体上呈现“先升后降”的变化趋势，而非呈“S”形增长。原因可能是①酵母菌增殖和衰退的速度均比较快，而我们观测的间隔时间较长。②我们没有相应补充培养液中所消耗的营养物质，使得营养物质消耗殆尽，酵母菌数量急剧下降。 由于我们实验所得的22℃马铃薯培养液下酵母菌种群增长曲线非呈“S”形增长，因此难以进行Logistic方程曲线的拟合[1]，故在此仅做种群曲线变化情况的分析。 一般而言，培养液中的酵母菌种群数量变化可以分为调整期、对数期、稳定期和衰亡期这 4 个时期[2]。 调整期：酵母菌培养开始时一般不立即增殖，而是要完成对新环境的调整和适应。这段时间内细胞代谢活跃，体积增长较快，大量合成细胞增殖所需的物质和能量[2]。如图2中培养的第1天。 对数期：是酵母菌生长、繁殖最旺盛的时期。这时期酵母菌代谢旺盛，形态、生理比较稳定[2]。如图2中培养的第2天到第4天。不过在图2的对数期中出现了升——降——升的情况，这可能是由于各人统计数据时的标准不统一，或计数时将一些杂质等计算在内，或计数时没有区分活菌和死菌等原因，使最终结果产生误差。 稳定期：当酵母细胞的繁殖速度达到最高峰时，其细胞总数不会再增加，新增加细胞数和死亡细胞数出现动态平衡[2]。若在稳定期停止培养，则酵母菌的种群增长曲线是呈“S”形的。但在图2中难以看出稳定期，这可能是因为该环境下酵母菌培养的稳定期非常短，不到一天的时间。 衰亡期：这一时期内营养物质消耗殆尽，有害代谢废物积累加剧，生长环境进一步恶化，酵母菌大量死亡[2]。如图2中的第5天至第10天。但从图中可以看到，在培养的第7天到第9天，酵母菌的种群数量出现稳定，下降速度明显减缓，这可能是因为在培养的第5天到第6天中，酵母菌大量减少，使得种群密度下降，对营养物及空间争夺相关的种内斗争减少所造成的[2]。但由于有害代谢废物积累，最终酵母菌数量还是在不断下降。 对比22℃马铃薯培养液下酵母菌的种群增长，在5℃马铃薯培养液中培养的结果（见图1）是，第1天至第8天，酵母菌种群数量没有明显增长，而到了第9天和第10天，酵母菌开始旺盛生长。这可能是因为低温抑制了酶的活性，使得调整期增长而导致的[3]。我们可以预测由于低温的影响，酵母菌生长的稳定期会延长，衰亡的速度会减慢[3]。 对比22℃马铃薯培养液下酵母菌的种群增长，在22℃蔗糖培养液中培养的结果（见图3）是酵母菌有少量生长，但很快便衰亡。这是因为在蔗糖培养液中酵母菌生长所需的碳源、 氮源、无机盐、生长素等缺少或不足，因此无论温度条件多么适宜，酵母菌的生长还是受到了不利影响[2]。 讨论 在本次实验中，进行酵母菌的计数时，应注意取菌液前必须摇匀，而且不能取底部马铃薯杂质沉淀较多的部分，因为这样会使得统计的数据摇摆不定[4]。同时，由于每个同学计数时的标准不一致，如对方格界限上的酵母菌的计算，出芽的酵母菌的计算等，这样最后的结果上会存在偏差[4]。另外