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实验六肝炎甲、乙、丙的意义
实验六;实验六;一、乙型肝炎表面抗原(HBsAg)测定;常用方法;
洗板;;;;;结果判断;定性酶免疫测定的CUT-OFF值;2、HBsAg 胶体金法;双抗体夹心法;这条带是HBsAg 抗体-HBsAg-金标粒子的复合物在膜上结合形成的。如是阴性,则测试区(T)内将没有紫红色条带。无论HBsAg是否存在于标本血样中,一条紫红色条带都会出现在质控区(C)内。质控区(C)内所显现的紫红色条带是判定是否有足够标本,层析过程是否正常的标准,同时也作为试剂的内控标准。
;;【操作步骤】;【结果判定】;; 金溶胶标记蛋白质,胶体金颗粒具有高电子密度的特性,故在金标蛋白的抗原抗体结合处,显微镜下可见黑褐色颗粒;当这些标记物在相应的标记处大量聚集时,可在载体膜上呈现肉眼可见红色或粉红色斑点(线),从而用于抗原或抗体物质的定位或定性。; 注意:测试区(T)内的紫红色条带可显现出颜色深浅的现象。但是,在规定的观察时间内,不论该色带颜色深浅,即使只有非常弱的色带也应判为阳性结果。;【灵敏度和特异性】;二、分析肝炎标志物检验结果;乙型肝炎表面抗原(HBsAg);乙型肝炎病毒 ( Hepatitis B Virus ); 检测方法:
SPRIA(固相放射免疫法)
ELISA(酶联免疫吸附试验)
RPHA(反向间接血凝试验)
化学发光法;临床意义
(1)乙肝的筛选和普查。
(2)HBsAg阴性不能完全排除乙型肝炎。
(3)同时出现HBsAg和抗-HBs,可能是不同亚型重复感染。
(4)如果仅表现为HBsAg阳性者,传染性较弱。 ;乙型肝炎表面抗体(HBsAb);临床意义
(1)抗-HBs阳性提示急性感染后的康复。
(2)在接受抗-HBs阳性血液的受血者中,可出现短暂性的抗-HBs阳性。
(3)HBV疫苗接种后,可出现抗-HBs阳性。
(4)抗-HBs与HBsAg同时阳性可见于暴发性肝炎或慢性活动性肝炎患者。
(5)HBsAg含量消失同时伴抗-HBs的出现,是目前临床上慢性乙型肝炎治疗的最终目标。 ;乙型肝炎e抗原(HBeAg); 乙型肝炎e抗体(HBeAb);乙型肝炎核心抗体(HBcAb-IgM);乙型肝炎核心抗体(HBcAb-IgG);HBV血清学标物;;前S抗原; 两对半和三对的检测方法;病例分析;HBV DNA与大三阳; 检验人员通过复查结果正确,在检验报告单上注明建议临床作HBV DNA检查。
理由:将ELISA检测阴性的血清,使用PCR技术检测乙肝核酸,,结果发现,在HBSAg阴性的血清中HBV DNA阳性率占10%,索凤霜等人报道,在295例HBSAg阴性的血清标本中Pre-S1Ag(+)13例,占4.4%。; 说明在HBSAg阴性的血清中Pre-S1Ag(+)确实存在,如果只作乙肝两对半,就会造成漏检,漏检的这部分患者如果参加义务献血,将对输血的安全性造成危害。所有,当存在上述模式时,乙肝建议再作乙肝核酸检查,看病毒是否复制;
生物学性状
免疫学检测学检测免疫免疫
属小RNA病毒科 特异性抗体检测
ELISA
化学发光法
;机体感染HAV后,可产生IgM、IgA、IgG抗体,抗HAV-IgM是病毒衣壳蛋白抗体。抗HAV-IgA是肠道粘膜分泌的局部抗体,抗HAV-IgG病愈后可长期存在。抗HAV-IgG阳性,提示即往感染,可作为流行病学调查的指标。
;抗HAV-IgM阳性,甲肝主要表现为急性黄疸性肝炎,所以,甲肝重在早期诊断,2周为100%是阳性,1月为76.5%,3月为23.5%,6月为5.9%,12月可为阴性。
;; 抗HCV-IgG (RNA)
机体感染HCV后,可产生IgM、 IgG抗体,一般在发病4周后抗HCV-IgM可阳性,持续1-4周。 HCV感染后多为慢性肝炎。所以,HCV的诊断多检测IgG,测HCV-IgG阳性,说明患者有感染,输血后肝炎有80%-90%的患者抗HCV-IgG阳性。
HCV感染后还可用PCR技术检测病毒核酸,其为HCV的确诊试验。判断病毒是否复制。
; 抗HCV-IgM超过半年不能转阴者,可能已转为慢性丙型肝炎。
抗HCV-IgG阳性表明已有HCV感染,经常输血、接受血制品治疗的患者,易合并HCV感染,并且易转为慢性肝硬化、肝Ca。 ;三、类风湿因子(RF)的测定;类风湿因子(rheumatoid factor,RF)是由于感染因子(细菌、病毒等)引起体内产生的以变性IgG(
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