注射用苦参碱对小鼠的半数致死量测定的论文.docVIP

　　注射用苦参碱对小鼠的半数致死量测定的论文 [摘要]　目的　了解注射用苦参碱对小鼠的半数致死量（ld50）。　方法　60只昆明种小鼠随机分为6组进行毒性试验，每组10只，雌雄各半，腹腔注射给药，剂量为150.0、120.0、90.0、60.0、30.0、0　mg/kg，记录小鼠出现的毒性反应症状与死亡时间，计算苦参碱对小鼠的ld50。解剖小鼠，取心、脾、肝、肺、肾等内脏，观察病理改变情况。　结果　分析小鼠的死亡数得回归方程probit　=　5.968　4-13.451　8x，苦参碱对小鼠的ld50为92.56　mg/kg，其95%置信区间为（79.53～106.38）mg/kg。　结论　苦参碱的毒性主要是作用于神经系统，高剂量苦参碱属于神经性毒剂，肺是苦参碱的主要毒性靶器官。 　　[关键词]　苦参碱；小鼠；半数致死量；毒性 　　[中图分类号]　r99 [文献标识码]　a [文章编号]　1674-4721（2012）12（c）-0064-02 　　苦参碱（matrine）是一种活性生物碱类化合物，是从苦参、广豆根、苦豆子等豆科植物中提取分离出的主要有效成分。研究显示，苦参碱具有多种药理活性，如抗肝纤维化、抗病毒、镇痛、解痉、抗心律失常、抗肿瘤、抗高血压、抗过敏、抗炎与免疫抑制等[1-3]。然而，中药有效成分的毒副作用不容忽视，文献报道高剂量苦参碱具有毒性作用[4]。为了了解苦参碱的毒性作用，为进一步考察苦参碱的毒效关系和研发苦参碱新型制剂提供实验数据，本文通过实验动物进行急性毒性试验，测定该药对小鼠的半数致死量（ld50）。. 　　1　材料与方法 　　1.1　实验动物 　　昆明种小鼠60只，清洁级，雌雄各半，由扬州大学实验动物中心提供，实验动物生产许可证号：scxk（苏）2007-0001，体质量18.3～23.1　g，平均体质量（21.4±0.5）　g。饲养条件：室温，相对湿度为40%～70%，定时进食普通饲料，自由饮水。所有小鼠均经过预饲养7　d，均健康、活动自如、营养状况良好。 　　1.2　药物 　　注射用苦参碱（150　mg/支，湖北午时药业股份有限公司，批号：070623）。 　　1.3　苦参碱对小鼠ld50的测定方法 　　采用点斜法测定苦参碱对小鼠的ld50[5]。根据初步试验结果确定苦参碱的剂量范围，采用的最大剂量为150.0　mg/kg，其余剂量为120.0、90.0、60.0、30.0　mg/kg，用适量注射用水充分溶解后用10%葡萄糖注射液稀释。将小鼠随机分为5个不同药物剂量的实验组，每组10只，雌雄各半；另外10只作为对照组，仅给予0.9%氯化钠溶液。小鼠禁食6　h后（不禁水）进行逐一称重，并按照体重确定计量后一次性腹腔注射给药。在试验当天观察给药后小鼠出现的毒性症状次数，第2日起每日观察症状2次以上，记录小鼠出现的症状与死亡时间。死亡的小鼠立即进行解剖，未死亡的小鼠连续观察7　d后处死并进行解剖，取心、脾、肝、肺、肾等内脏，观察病理改变情况。 　　1.4　统计学方法 　　计量资料用x±s表示，采用spss　19.0统计学软件处理数据，采用probit回归法拟合回归方程和计算苦参碱对小鼠的ld50与置信区间，采用χ2检验法检验回归方程拟合优度。 　　2　结果 　　2.1　小鼠的观察结果 　　对照组小鼠正常生长，活动自如，体质量增加。60.0、30.0　mg/kg剂量组给药后，大多数小鼠活动自如，状态正常，体质量增加；少数出现前肢稍震颤、轻度不安。150.0、120.0、90.0　mg/kg剂量组给药后，一部分小鼠出现行动迟缓、活动减少、身体蜷缩、双眼紧闭、肌肉震颤等症状；一部分小鼠给药数分钟后出现精神兴奋、身体发抖，甚至是强直性痉挛；一部分小鼠出现上述症状后数小时内死亡。死亡小鼠的尸体解剖可见肺部充血性水肿，而心、脾、肝、肾脏无显著改变。出现毒性症状而未死亡的小鼠症状逐渐消失，体质量增加，活动逐渐恢复正常。 　　2.2　回归方程与ld50结果 　　采用probit法分析6组小鼠的死亡数，得回归方程为probit　=　5.968　4-13.451　8x，拟合优度检验χ2　=　0.318，p　=　0.986。由回归方程可计算出：当prob　=　0.50时，注射用苦参碱对小鼠的ld50值为92.56　mg/kg，其95%置信区间为（79.53～106.38）　mg/kg。 　　3　讨论 　　苦参碱的化学名为苦参啶-15-酮，化学分子式为c15h24n2o。注射用苦参碱是目前苦参碱的主要临床制剂，为白色疏松块状物或粉末，具有吸湿性，用适量注射用水充分溶解后加入10%葡萄糖注射液中缓慢静脉滴注[6]。注射用苦参碱有利尿退黄、 毒、清热利湿、退黄