第六章 发酵液的预处理及固液分离.pptVIP

第六章　发酵液的预处理及固液分离;抗生素下游加工的一般过程;第一节　发酵液的性质;二、抗生素的稳定性;三、发酵液中的杂质;第二节　发酵液预处理的方法;二、发酵液预处理的要求;　２、蛋白质的去除 发酵液中去除菌体和固体悬浮物后，一些可溶性蛋白质仍留在滤液中，需设法去除。 除去蛋白质的滤液要保证在一定的pH 范围内不发生混浊，否则影响溶媒提取和离子交换提取。 ;３、重金属离子的去除 重金属离子的存在，会影响提取和精制，同时会影响发酵产物的质量和回收率，故必须除去。 ４、色素、热原质、毒性物质的去除 针对药用发酵产品尤为重要。尤其是针剂。 ;５、改变发酵液性质，以利于提取和精制后续工序的操作顺利进行 如，当发酵终了时，发酵产物可能在发酵液中，也可以在菌体内部或两相同时存在。常采用调节pH、酸性或碱性的方法使发酵产物转入后续处理的相中。 ６、调整适当pH值和温度 避免引起产物的破坏和损失。多数抗生素不耐热，对pH值要求高。;三、蛋白质的预处理（除杂蛋白） 1．等电点沉淀 2. 变性沉淀 3．加各种沉淀剂沉淀 4．加入凝聚剂（金属盐） 5．加入絮凝剂 ;1．等电点沉淀 　调Ph到等电点，杂蛋白的净电荷为零，溶解 度最小，沉淀析出。 　多数抗生素发酵液的等电点4.0-5.5之间， 一般加酸调。如：硫酸、盐酸、磷酸等。 2. 变性沉淀（凝固）： ①加热，但多数抗生素不耐热，只适用于热稳定 抗生素。如：灰黄霉素 ②加酒精、丙酮等有机溶剂或表面活性剂等 ;3．加沉淀剂沉淀： 对酸性发酵液：可加阴离子，如三氯乙酸，鞣酸等 对碱性发酵液：可加阳离子，如Ag+、Cu2+、Zn2+等 4．加入凝聚剂（金属盐） 凝集剂的作用：粒子表面电荷中和；消除粒子表面稳定的双电荷层；使胶体粒子的排斥电位降低而发生聚沉。 金属盐特别是重金属盐较常用。如，硫酸铝、三氯化铁等;5．加入絮凝剂 絮凝是指某些高分子絮凝剂能在悬浮粒子之间产生桥梁作用，使胶粒形成粗大絮凝团的过程。 近年较常用。如，壳聚糖、海藻酸钠、明胶的等（带有氨基、羧酸基等，电荷密度高。;5．加入絮凝剂 絮凝是指某些高分子絮凝剂能在悬浮粒子之间产生桥梁作用，使胶粒形成粗大絮凝团的过程。 近年较常用。如，壳聚糖、海藻酸钠、明胶的等（带有氨基、羧酸基等，电荷密度高。;四、高价金属离子的去除 Ca2+： 加入草酸钠或草酸，生成的草酸钙沉淀还能促使杂蛋白质凝固，提高滤速和滤液质量。 Mg2+： 草酸、 磷酸盐（在碱性条件下，生成磷酸镁盐沉淀）、三聚磷酸钠。 ;Fe3+： 加入黄血盐，形成普鲁士蓝沉淀。 ;第三节　发酵液的液固分离;三、影响固液分离的因素　　　　　　;四、固液分离常用方法：过滤和离心 过滤：悬浮液通过过滤介质时固态颗粒与溶液分离。分为澄清过滤和滤饼过滤。 　离心分离：在离心力场的作用下，将悬浮液中的固相与液相加以分离，多用于颗粒较小的悬浮液和乳浊液的分离。 ; 在某一支撑物上放过滤介质，注入含固体颗粒的溶液，使液体通过，固体颗粒留下。; 1）常规过滤： 料液流动方向与过滤介质垂直。通常适于过滤直径较大的悬浮粒子。如放线菌、霉菌发酵液。 对细小菌体或黏度较大的发酵液，需使用助滤剂。 2）滤饼过滤： 当悬浮液通过滤布时，固体颗粒被滤布阻拦而逐渐形成滤饼（滤渣）。 在滤饼过滤中，当滤饼至一定厚度时即起主要的过滤作用 适合于固体含量大于0.1%的悬浮液的过滤分离。; 3）错流过滤： 又称切向流过滤（Cross-Flow Filtration） 传统过滤时过滤液体垂直于过滤介质，过滤阻 力主要来之滤饼。错流过滤打破了传统过滤的 机制，即液体的流向和滤膜相切。 在压力推动下，悬浮液以高速在管状滤膜的内 壁作切向流动，利用流动的剪切作用将过滤介 质表面的固体（滤饼）移走，而附着在滤膜上 的滤饼很薄，因而能在长时间内保持稳定不变 的过滤速度;;2、过滤介质选择;发酵液中悬浮离子的大小 ;过滤介质的种类 1、织物介质 2、粒状介质 3、多孔固体介质 4、微孔纤维素薄膜和金属薄膜介质;1）织物介质 又称滤布，应用最广泛，包括由棉、麻等天然纤维滤布和合成纤维滤布。 其过滤性能受许多因素的影响，其中最重要的是纤维的特性、编织纹法和线型。 2）粒状介质 有硅藻土、珍珠岩粉、细砂、活性炭、白土等。 最常用的是硅藻土，是优良的过滤介质： ①一般不与酸碱反应，化学性能稳定； ②形状不规则，空隙大且多孔，具有很大的吸附表面；