姜黃素抑制大鼠創伤性骨关节炎模型中软骨细胞核因子κB P65核转位的实验研究.docVIP

www.CRTER.org 王健，等. 姜黄素抑制大鼠创伤性骨关节炎模型中软骨细胞核因子κB P65核转位的实验研究 www.CRTER.org 王健，等. 姜黄素抑制大鼠创伤性骨关节炎模型中软骨细胞核因子κB P65核转位的实验研究 PAGE 2170 P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org PAGE 3 P.O.Box 1200,Shenyang 110004 k 中国组织工程研究 第20卷 第15期 2016–04–08出版 www.CRTER.org Chinese Journal of Tissue Engineering Research April 8, 2016 Vol.20, No.15 ·研究原著· PAGE 2163 ISSN 2095-4344 CN 21-1581/R CODEN: ZLKHAH 姜黄素抑制大鼠创伤性骨关节炎模型中软骨细胞核因子κB P65 核转位的实验研究 王 健，马 捷，顾剑华，王富勇，尚修帅，王兆飞，王 祥，陶海荣(上海交通大学医学院附属第九人民医院，上海市 201900) 引用本文：王健，马捷，顾剑华，王富勇，尚修帅，王兆飞，王祥，陶海荣. 姜黄素抑制大鼠创伤性骨关节炎模型中软骨细胞核因子κB P65核转位的实验研究[J].中国组织工程研究，2016，20(15):2163-2170. DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2016.15.005 ORCID: 0000-0002-4264-8337(王健) 文章快速阅读： 分析姜黄素防止骨关节炎中软骨损伤的作用机制 王健，男，1990年生，安徽省安庆市人，汉族，上海交通大学医学院在读硕士，主要从事骨关节炎的基础研究。 通讯作者：陶海荣，博士，副主任医师，硕士生导师，上海交通大学医学院附属第九人民医院骨科，上海市 201900 并列通讯作者：王祥，博士，副主任医师，上海交通大学医学院附属第九人民医院骨科，上海市 201900 中图分类号:R318 文献标识码:A 文章编号:2095-4344 (2016)15-02163-08 稿件接受：2016-02-04 http://WWW. SD 大鼠 30 只随机为分组：假手术组15只和模型组15只 检测指标： (1)姜黄素对骨关节炎软骨细胞核因子κB P65 核转位的影响。 (2)姜黄素对骨关节炎软骨细胞Ⅱ型胶原、基质金属蛋白酶1、基质金属蛋白酶13表达的影响。 (1)模型组建立大鼠创伤性骨关节炎模型并做阳性对照组。(2)假手术组只切开关节腔假手术做阴性对照组。 分离软骨细胞进行体外培养： ①阴性对照组：正常的关节软骨细胞； ②阳性对照组：成功造模后的关节软骨细胞； ③姜黄素组：骨关节炎软骨细胞加入姜黄素； ④PDTC组：骨关节炎软骨细胞加入PDTC。 骨关节炎模型鉴定 骨关节炎模型组 正常组织组 文题释义： 姜黄素：是从姜科、天南星科中的一些植物根茎中提取的一种化学成分，分子式为C21H20O6，为二酮类化合物。 核因子κBp65的核转位：核因子κB是一种在细胞浆中广泛表达的转录因子，p65-p50二聚体是其主要的存在形式。当细胞处于静息状态时，核因子κB通过与抑制性蛋白IκBα结合，从而以无活性的形式存在于细胞质中。在多种外界因素刺激下，其活性可以被多种因子激活，这些因子产生的第2信使信号导致IκBα的磷酸化和泛素化，继而被降解，核因子κB 脱离了IκBα的阻滞，可转位至细胞核，p65的核转位是核因子κB信号转导通路活化的重要标志。 摘要 背景：骨关节炎软骨细胞的退化是由于一系列的机械因素、炎性递质、生化因素，尤其是基质金属蛋白酶和活性氧等共同作用导致的。姜黄素在体外已被证明是一种有效地活性氧清除剂和活性氮提供剂，但保护关节软骨抑制骨关节炎作用和机制尚不明确。 目的：分析姜黄素防止骨关节炎中软骨损伤的作用机制。 方法：SD大鼠 30 只随机分为假手术组15只和模型组15只。模型组建立大鼠创伤性骨关节炎模型(阳性对照组)，分离软骨细胞进行体外培养，使用姜黄素(姜黄素组)和特异性的核因子κB抑制剂(PDTC组)共培养软骨细胞 24 h，Western Blotting和免疫荧光检测核因子κB P65核内外表达情况。RT-qPCR 检测细胞Ⅱ型胶原、基质金属蛋白酶1、基质金属蛋白酶13的表达。 PAGE 2167