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基因工程[浙版老师)
下面是DNA分子平面图,说出图中1-11的名称。 ;什么叫基因工程?;第一节
工具酶的发现和基因工程的诞生; 一.限制性核酸内切酶 (约4000种) 1.高度特异性的酶 ①某种该酶只能识别双链DNA分子的某种特殊核苷酸序列, ②只能把特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。;EcoRⅠ 限制酶;CTTCATG AATTCCCTAA ;二.DNA连接酶;;;质粒; DNA重组技术的三件工具: 限制性内切酶、DNA连接酶、 载体(如:质粒)。;2(组)重组DNA的形成;;第二步.形成重组DNA分子 (核心);受体细胞(如大肠杆菌)
氯化钙处理
细胞壁的通透性增大
重组质粒进入受体细胞
目的基因随受体细胞的繁殖而复制 ; 质粒;4.重组DNA导入动物细胞; 第四步.筛选含有目的基因受体细胞
可以通过检测标记基因的有无,判断目的基因是否导入。
筛选原理:质粒上有标记基因
筛选方法:利用选择培养基筛选
如:重组DNA分子,由具有青霉素抗性基因的质粒和目的基因组合形成,则可检测受体细胞是否具有青霉素抗性,判断目的基因是否导入受体细胞。;2.表达成功的标志:;基因操作的基本步骤示意图;基因工程说明哪些问题?;1.限制性核酸内切酶的作用实际上就是把DNA上某些化学键打断,如一种能对GAATTC专一识别的限制性核酸内切酶,打断的化学键是:
A.G与A之间的键 B.G与C之间的键
C.A与T之间的键 D.磷酸与脱氧核糖之间的键
2.下列DNA连接酶的作用叙述正确的是( )
A.DNA连接酶的基本组成单位是脱氧核苷酸
B.将单个核苷酸加到DNA片段的骨架上连接起来,重新形成磷酸二酯键
C.连接DNA链上碱基之间的氢键
D.将断开的两个DNA片段的骨架连接起来,重新形成磷酸二酯键
;3.质粒是基因工程常用的载体,它的特点是( )
①能自主复制 ②不能复制 ③结构简单
④单链DNA ⑤环状DNA ⑥含有标记基因
A.①③⑤⑥ B.③④⑤⑥
C.①③④⑤ D.②③④⑤
4.质粒之所以能做基因工程的运载体,是由于它
A.含蛋白质,从而能完成生命活动
B.能自我复制,保持连续性
C.是RNA,能指导蛋白质的合成
D.具有环状结构,能携带目的基因; 5.用基因工程技术可使大肠杆菌合成人的蛋白质。 下列叙述不正确的是
A.常用相同的限制性内切酶处理的基因和质粒
B.DNA连接酶和 RNA聚合酶是构建重组质粒必需的工具酶
C.可用含抗生素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质D.导入大肠杆菌的目的基因不一定能成功表达
6.下列关于基因工程的叙述,正确的是[ ]
A 限制性内切酶的切口一定是GAATTC碱基序列.
B 一种限制性内切酶只能识别一种特定的核苷酸序列.
C 目的基因就是指DNA质粒.
D 只要检测出受体含有目的基因,目的基因就一定能成功地进行表达.
;7.基因工程又叫基因拼接技术。 (1)在该技术中,用人工合成方法获得目的基因的 途径之一是:以目的基因转录的 为模板, ______成互补的单链DNA,然后在酶的作用下合成
_______________
(2)基因工程的受体细胞有细菌、真菌、__________。
(3)假设以大肠杆菌质粒作为运载体,并以同一种限制性内切酶切割运载体与目的基因,将切割后的运载体与目的基因片段混合,并加入DNA连接酶。连接产物至少有 种环状DNA分子,它们分别
是
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