第08章吸光光度法选编.ppt

第八章 吸光光度法;Date;吸光光度法概述;特点：;§8.1 吸光光度法基本原理;表8-1 物质颜色与吸收光颜色的互补关系;电子能级间跃迁;吸收曲线与最大吸收波长;吸收曲线的讨论：;吸收曲线的讨论：;8.1.2 光的吸收基本定律 ──朗伯-比耳（Larnbert-Beer）定律;式中 A：吸光度；描述溶液对光的吸收程度； b：液层厚度(光程长度)，通常以cm为单位； c：溶液的物质的量浓度，单位 mol·L-１； ε：摩尔吸收系数，单位 L·mol-１·cm-１； 或: A = lg(I0/It) = a b c c：溶液的浓度，单位g·L-１ a：吸收系数，单位L·g-１·cm-１ a与κ的关系为： a = ε /M （M为摩尔质量） ;透过度T : 描述入射光透过溶液的程度 T = I / I0 吸光度A与透射比T 的关系:;（1）吸收物质在一定波长和溶剂条件下的特征常数； （2）不随浓度c和光程长度b的改变而改变。在温度和波长等条件一定时， κ仅与吸收物质本身的性质有关，与待测物浓度无关； （3）同一吸收物质在不同波长下的ε值是不同的。在最大吸收波长λmax处的摩尔吸收系数εmax表明了该吸收物质最大限度的吸光能力，也反映了光度法测定该物质可能达到的最大灵敏度。 ;（4）可作为定性鉴定的参数； （5）物质的吸光能力的度量 εmax越大表明该物质的吸光能力越强，用光度法测定该物质的灵敏度越高。 κ 105：超高灵敏； ε = (6～10）×104 ：高灵敏； ε = 104～ 103 ：中等灵敏； ε 103 ：不灵敏。 （6） ε在数值上等于浓度为1 mol ·L-1、液层厚度为1cm时该溶液在某一波长下的吸光度。 ;8.1.3 偏离比耳定律的原因;物理性因素：;非单色光作为入射光引起的偏离：; A总 = lg（Ｉ0总/Ｉt总 ) = lg(I01 +Ｉ02)/(Ｉt1 +Ｉt2 ） = lg(I01 +Ｉo2)/(Ｉ01 10 -ε1bc +Ｉ02 10 -ε2bc ） ε1 =ε2 ； ;讨论：;讨论：;讨论：;(2) 化学性因素;§8.2 光度计及其基本部件;分光光度计;8.2.1 基本组成;8.2.2 主要部件;2. 单色器;光栅;3. 样品室;4. 检测系统;(2)光电二极管阵列;§8.3 显色反应与条件的选择;3.氧化还原显色反应;8.3.2 显色剂;8.3.3 显色反应条件的选择;4. 干扰的消除;8.3.3 三元配合物在光度分析中 的应用特性简介;§8.4 吸光度测量条件的选择;8.4.2 参比溶液的选择;⑵ 若显色剂或其他所加试剂在测定波长处略有吸收,而试液本身无吸收，用“试剂空白”(不加试样溶液)作参比溶液； ⑶ 若待测试液在测定波长处有吸收，而显色剂等无吸收，则可用“试样空白”(不加显色剂)作参比溶液； ⑷ 若显色剂、试液中其他组分在测量波长处有吸收,则可在试液中加入适当掩蔽剂将待测组分掩蔽后再加显色剂，作为参比溶液。;8.4.3 吸光度读数范围的选择;最佳读数范围与最佳值:;§8.5 吸光光度法的应用;8.5.2配合物组成的测定;思考题;思考题