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平板劃線试验
平板划线实验;一、培养基;二、细菌的接种方法;常见的几种细菌的培养和基接种方法举例 ;三、平板划线接种法 ;(2)灭菌接种环
点燃酒精灯,右手以持笔式握持接种环,并放置火焰中烧灼灭菌,先将接种环的接种丝部分置于火焰中,待金属丝烧红并蔓延至金属端,再直接烧灼金属环直至烧红,然后由金属环至金属杆方向快速通过火焰,随后再反方向通过火焰,如此2~3次。然后将接种环移开火焰,待其冷却。;;(3)取菌种
左手持装有金黄色葡萄球菌或大肠杆菌菌液的试管,用持有接种环的右手手掌及小指拔取试管塞,将试管管口迅速通过火焰2~3次进行灭菌。
将已灭菌且已冷却的接种环伸入菌种管中,取一接种环的菌液,然后退出菌种管,将菌种管管口再次通过火焰2~3次灭菌,塞好试管塞,放至原来的位置。 ;(4)分离划线接种细菌(四区接种法)
①左手持琼脂平板培养基??将皿盖反放在桌上酒精灯附近),尽量使之直立以免空气中的细菌落入其中,并靠近火焰。右手持接种环在琼脂平板上端来回划线,涂成一细菌薄膜(约占平板的1/10),视为一区。划线时使接种环与接种平板面呈30~40度角,以腕力在平板表面行轻而快地来回滑动动作。
②旋转琼脂平板90度,烧灼接种环,以杀灭环上的残留细菌,将接种环触及培养基表面以使其冷却。灭菌接种环通过薄膜处作连续平行划线(约占平板1/5),此视为二区。; ③旋转琼脂平板90度,灼烧接种环灭菌并使之冷却。将灭菌接种环接二区连续平行划线(约占平板1/4),此为三区。
④旋转琼脂平板90度,接种环不必再灭菌,接三区连续平行划线,划满平板其余部分,此视为四区。
各区接种线间尽量互不交接,以达到细菌逐渐稀释的目的。 ;平板划线接种法 ;Evaluation only.
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Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;(5)划线完毕,将琼脂平板放进皿盖,将培养皿倒放,放进37℃温箱培养。
(6)培养18~24h后将培养皿取出。观察琼脂平板表面生长的各种菌落,注意其大小、形状、边缘、表面结构、透明度、颜色等性状。 ;谢谢!
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