2015-2016学年浙科版实验12乳酸脱氢酶同工酶的分离学案.docVIP

PAGE  PAGE 2 实验12乳酸脱氢酶同工酶的分离 浙科版 一、乳酸脱氢酶 1．简称：____ 2．作用：在____________存在下，乳酸脱氢酶能使______产生________，具体反应式见下： ________________________________________________________________________。 答案：1.LDH　 2．氧化型辅酶NAD＋　乳酸　丙酮酸　CH3－CHOH－COOH＋NAD＋LDH,CH3－CO－COOH＋NADH＋H＋ (乳酸)　　　　　　　　　(丙酮酸) 二、同工酶 1．概念：指能____________，但其________________的一组酶。 2．实例：LDH有____种同工酶。 3．LDH同工酶： 结构特点：由____种亚基____和____以不同比例组成的________。 具体类型：______、______、______、______和M4。 存在特点：在动物的________________中，LDH各种同工酶的______不同。 答案：1.催化同一化学反应　酶蛋白的分子组成不同 2．5 3．2　L　M　四聚体　H4　H3M　H2M2　HM3　细胞分化及胚胎发育过程　比例 三、乳酸脱氢酶同工酶的分离实验 1．实验方法：____________法。 2．染色： (1)方法：________法 (2)染色原理：在LDH的作用下，NAD＋被还原为NADH，NADH将______和______传递给甲硫吩嗪(PMS)，还原的甲硫吩嗪再将______和______传递给氯化氮蓝四唑(NBT)，还原的氮蓝四唑呈____色，展现在电泳凝胶上。 3．实验材料：牛的______，其余略。 4．实验步骤： 制备________ ↓ 加样 ↓ ________ ↓ ________ 答案：1.聚丙烯酰胺电泳 2．(1)活性染色　(2)电子　H＋　电子　H＋　蓝 3．血清 4．电泳凝胶板　电泳　染色