2015-2016学年浙科版实验一大肠杆菌的培养和分离学案1.docVIP

PAGE  PAGE 4 选修1 生物技术实践 第一部分 微生物的利用——大肠杆菌的培养和分离学案 一、课标内容：进行微生物的分离和培养 二、教学要求： 基本要求进行大肠杆菌的扩增，利用液体培养基进行细菌培养的操作。 进行大肠杆菌的分离，用固体平面培养基进行细菌的划线培养。发展要求说明大肠杆菌培养的条件和实验原理。说明实验2和实验3不作要求。三、知识要点： 1．微生物是指结构 、形体 的 细胞、 细胞或 细胞结构的 生物，如 。绝大多数微生物与传染病无关，对人类 ，有多种用途。 2．细菌是单细胞的 生物，从形态上分为 菌、 菌、 菌（弧菌）。细菌结构上，有 ，无 ，只有一环状 。有些细菌外有荚膜和鞭毛。有些细菌在不良的环境条件下，细胞里面形成一个椭圆形的休眠体，叫做 。当环境适宜时，休眠体又可以萌发，形成一个细菌。细菌繁殖方式: 繁殖，速度很快。单个细菌在固体培养基上大量繁殖时，就会形成一个肉眼可见的，具有一定形态结构的子细胞群体，叫做 。他是 的重要依据。细菌在基因工程中应用广泛，可为其提供 载体，也可作为 细胞。细菌用革兰氏染色法分为革兰氏 菌和 菌两大类，区别在 的成分不同。大肠杆菌是革兰氏 、 厌氧的肠道 菌。 3．培养基按物理状态分： 培养基、 培养基、 培养基。其中液体培养基常用于 ，半固体培养基可观察微生物的 ，固体培养基用于 。细菌扩大培养要用 培养基，细菌分离要用 培养基。细菌的分离方法有两种： 和 。是消除 的通用方法，也是用于 高表达量菌株的最简便方法之一。划线分离法，方法 ；涂布分离法，单菌落 ，但操作 。不同的微生物往往需要采用不同的培养基配方，细菌 ，霉菌 。通常细菌培养基要用 和 提取物来配制，还要加入一定的 ，以维持一定的渗透压；霉菌培养基一般用 配制或 豆芽汁即可。尽管培养基的配方各不相同，但一般都含有 、 、 和 等营养物质。另外还需要满足微生物生长对 、 、 等的要求。如细菌需要 环境，霉菌需要 环境；厌氧生物需要控制 含量。有的还需要在培养基中加入特殊营养物质。 4.在培养微生物时，必须进行 。（1）对实验操作空间、操作者的衣着和手进行清洁和 ；（2）将培养器皿、接种用具和使用前和使用后的培养基等进行 ；（3）为避免周围微生物污染，实验操作应在超净台的 火焰附近旁进行；（4）避免已灭菌处理的材料用具与周围物品相接触。 常用的消毒方法： ，常用的灭菌方法：（1）灼烧灭菌，适用于 ；（2）干热灭菌 ℃下加热 ，适用于 ；（3） 灭菌：1kg/cm2、 ℃、 min 通常用于 ，如果各种器皿用此法灭菌，灭菌后放入 的烘箱中烘干，再放到 ，打开 和过滤风，灭菌 min。 比较项理化因素的作用强度消灭微生物的数量芽孢和孢子能否被消灭消毒较为温和大部分致病的微生物不能灭菌强烈全部微生物能5.大肠杆菌的培养和分