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6RP-HPLC方法学的建立教程
浅谈RP-HPLC方法的建立;高效液相色谱法总论;卓有成效的工作方法;卓有成效的工作方法;样品的性质和预处理;分离的基础：流动相的作用;
当峰发生重叠时，难以准确测量到基线处的峰宽，更的办法好是用半高处的相应峰宽?1和?2：
Rs= 1.18(t2-t1)/ (?1+?2)
Rs≥1.25在一般情况下，能达到≥99％的分离度。
新柱的起始色谱图的Rs值越大，意味着该柱用此法时间越长。
Rs≤1.0时 定量分析一般精密度较差。;;;;分离度与溶剂强度的关系;;;;柱类型与温度选择性的关系;色谱柱与塔板数的关系;;;色谱柱条件;其他因素;;;色谱柱问题与解决办法;谱峰拖尾;;;柱外效应;系统方法的建立;梯度洗脱优点;;;;;反相HPLC中的溶剂优化;困难样品：多元梯度;;优化反相HPLC步骤;
3 如果色谱峰复杂，分离较差：
延长梯度时间
加长柱长
使用细粒度的柱
降低流速以提高塔板数
4 一旦色谱图中能容纳所用峰，改变流 速以调整峰间距
5 需要进一步改变谱峰间距，改变有机溶剂;重现性好的分离;等梯度反相分离;;;;;;保证柱寿命和性能的步骤;
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