不同水稻受体材料对洁净 DNA 转化效率的影响.pdfVIP

江 苏农业科学 ????年第 ??卷第 ?期? —?—— ????——? 赵? 潇．不 同水稻受体材料对洁净 ???转化效率的影响???．江苏农业科 学，????，?????：??— ??? 不 同水稻受体材料对 洁净 ???转化效率 的影 响? 赵 潇? ?浙江经贸职业技术学院应用工程系 ，浙江杭州 ???????? 摘要 ：选取不 同诱导条件 ???℃光照 、??℃黑暗 、??℃光照 、??℃黑暗 ?，不同继代次数初代培养 、?次继代培养 、?? 次继代培养的愈伤组织，分别作为转化受体材料，研究不同受体材料对洁净 ???转化效率的影响。结果表明，??℃? 光培养诱导的愈伤经过 ?次继代后作为转化受体材料 ，得到的转化效率最高 ，达到 ?．??％ 。? 关键词 ：水稻 ；受体材料 ；洁净 ???转化 ；转化效率? 中图分类号 ：????；????．??? 文献标志码 ：?? 文章 编号 ：????— ????????????— ????— ??? 传统的遗传转化中，普遍使用完整质粒 ???，非 目的基? ?．? 基 因? 因的质粒载体主干序列经常随着 目的基 因整合到植物基 因组? 含有 ???基 因的载体质粒为 ????，????质粒菌保由中国? 中，并通过形成稳定的次级结构 ，产生重组热点或导致异常重? 水 稻研究 所水 稻生 物 学重 点实 验室 种质 创新 课题 组提 供。? 组 ，重组产生 的基因多拷贝经常导致 转基因 的低 表达甚至基? ????质粒大小为 ?．?????，结构如 图 ?所示。? 因沉默”?。基因枪介导 的洁净 ???转化 技术是直接将 外源? ?．? 培养基? 基 因表达框线性 ???导入植物基因组 中 ，所 得不含非 目的基? 试 验中所需 的培养基见表 ?。? 因的 ???序列 ，获得 安全 的转基因植株? 。基因枪转化 的受? ?．? 水 稻 愈 伤 组 织诱 导? 体材料 ，所处 的生理状态不 同，接受外源 ???的能力也不同。? ?．?．? 不同条件下诱 导 的愈伤组 织 挑 选籽粒饱 满的 日本? 一 般认为生理活性高 的组织 或细胞有利 于 ???的摄入 与整? 晴成熟种 子 ，粗糙 去 壳 ，再挑 选 胚完 整 而无 裂 纹 的种 子 ，用? 合? 。选用再 生能力强的外植体 为转化受体 ，将有利 于转化? ??％ 的乙醇 浸泡 ????，再用体 积分数 ??％次氯酸 钠溶液 ?有? 频率的提高。本研究主要选取不 同诱导条件 ，不 同继 代次数? 效氯 ≥ ?％ ?中浸 泡 ??????，重复该操 作 ?次 ，用 无菌