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2012 年 22( 4) 生 物 技 术 15
黄瓜 ERA F17 基因的克隆及相关功能载体构建
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( 长春师范学院生命科学学院，吉林 长春 130032; 2 东北师范大学遗传所，吉林 长春 130024 )
摘要: 目 的: 探讨黄瓜性别相关基因 ERA F17 在黄瓜性别调控 过程中 的作用? 方法: 通过 R T - PC R 法 克隆黄瓜 性别相 关基
因 ERA F17，利用分子克隆技术将目的片段连入植物化学诱导表达载体 pER 8，选择部分 ERA F17 序列构建含有目的片段发卡结构
的沉默???体?构建原核表达载体 pET - 28a - ER A F17 在大肠杆菌中诱导表达 ERAF17 蛋白 并进行纯 化?结果: 成功构建 了植物
化学诱导表达载体 pER 8 - ERA F17 和 含有目的片段发卡结构的沉 默载体 pM BW 330 - E RA F17 - hp，在 含有 pET - 28a - E RA F17
原核表达载体的大肠杆菌中加入 IPT G 诱导 3h后 ER A F17 表达量最高，通过 NT - age rose 介质成功 纯化出 ERA F17 的编码蛋 白?
结论: 所构建载 体可用于 ERAF17 基因的功能研究?
关键词: ERA F17 ; 化学诱导表达载体; 发卡结构 ; 原核表达
中图分类号: Q 812 文献标识码: A doi: 10.39 69 /j.issn.1004 - 311X.2012 .04.82
C? ? ? ? ? ? ? ? ? A? 17 C? ? ? ? ? ? ? R? ? ? ? ? ? V? ? ? ? ? ? C? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
FA N Ya- ju n1 ，LI W e i2
( 1.D e partment ofBiology，C hangchu n NormalU niversity，Changchu n 130032，C hina;
2.Institu te ofG e netics andC ytology，Northeast Norm alU niversity，C hangchu n 130024，C hina)
A? ? ? ? ? ? ? : O ? ? ? ? ? ? ? ? : R e se archo
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