DNA重组的操作教程.ppt

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2017-04-25 发布于湖北
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DNA重组的操作教程

第六章 DNA重组的操作;外源DNA;第一节 DNA的体外重组; 1、粘性末端的连接 ;第一节 DNA的体外重组;第一节 DNA的体外重组;第一节 DNA的体外重组;第一节 DNA的体外重组;第一节 DNA的体外重组;第一节 DNA的体外重组;第一节 DNA的体外重组;第一节 DNA的体外重组;第一节 DNA的体外重组;第一节 DNA的体外重组;;第一节 DNA的体外重组;第一节 DNA的体外重组;第一节 DNA的体外重组;第一节 DNA的体外重组;第一节 DNA的体外重组;;第一节重组DNA分子的构建;第一节 DNA的体外重组;第一节 DNA的体外重组;第一节 DNA的体外重组;第一节 DNA的体外重组;第一节 DNA的体外重组;第一节 DNA的体外重组;;;1. 粘性末端连接（1）两端具有相同粘末端的DNA分子之间的连接（2）两端具有不同粘性末端的DNA分子之间的连接 2. 平头末端连接（1）直接连接（2）人工加尾形成 “粘性末端” a)同聚加尾法 b)衔接物连接 c) DNA接头连接法 3. PCR产物的连接（1）在引物的5’端设计酶切位点（2）与T载体直接连接;;第一节 DNA的体外重组;第一节 DNA的体外重组;第一节 DNA的体外重组;　　　3. 防止载体自身环化连接　（1）提高插入片断的用量　　　　连接反应体系中，插入片断比载体多10倍以上。　（2）用碱性磷酸酶处理载体　　　载体切口的5’磷酸被除去，不能自我连接。;三、载体和外源DNA插入片段的连接结果;;;