第三讲离心[Chapter3Centrifugation]选编.pptVIP

第三章 离心;优点： 分离速度快， 分离效率高、 液相澄清度好； 缺点： 与过滤设备相比，设备投资高、 能耗大、 离心产生的固体浓缩物和过滤产生的浓缩不同。 通常情况下离心只能得到一种较为浓缩的悬浮液或浆体。而过滤可获得的水分含量较低的滤饼。;离心力与转速; 离心分离是基于固体颗粒和周围液体密度存在差异，在离心场中使不同密度的固体颗粒加速沉降的分离过程，当静置悬浮液时，密度较大的固体颗粒在重力作用下逐渐下沉，这一过程称为沉降。由于沉降和离心相似，这儿就放在一块讨论。;离心产生的固体浓缩物和过滤产生的浓缩不同。 通常情况下离心只能得到一种较为浓缩的悬浮液或浆体。 过滤可获得的水分含量较低的滤饼。 对大多数生物发酵液可以离心但不能有效地过滤分离，所以离心往往是很有效的方法。;A. 沉降;F;FB=﹝πd3(ρs-ρ)/6﹞a. (3.1) d -微粒半径，m ρs ，ρ-分别为微粒和液体介质密度，kg/m3 a - 微粒加速度, m/s2; 在稀溶液中，作用于单个球形微粒上的阻力FD，可用Stoks（斯托克斯）定律表示。 FD=3πdμν (3.2) μ 连续介质粘度 ν 微粒运动速度 这个等式仅当球形微粒较小时方能成立。; 当Re 1 时 Re=dρν/μ1 (3.3) 等式3.3 基本上满足所有的生物溶液。 如果Re1时，阻力为 FD=f(ρν2/2)(πd2/4) (3.4) f是摩擦因子; 当球形粒子在介质中运动时速度较小，因此作用其上的阻力也较小，当阻力与浮力平衡时，微粒加速度为零。联立方程3.1和3.2，得到 ν=d2(ρs-ρ)a/(18μ) (3.5) 此式给出了微粒稳定状态和最终速度 对于沉降，重力沉降加速度为重力加速度） νg= d2(ρs-ρ)g/(18μ) (3.6) ;离心沉降加速度则不同 a=rω2 νω= d2(ρs-ρ)rω2/(18μ) (3.7) ω-转鼓回转角速度，r/s） r为转鼓中心轴线与微粒间距离，m;按速度和离心力： 1、常速离心机 最大转速8000rpm(r/min),相对离心力(RCF)104g以下,用于细胞、菌体和培养基残渣等分离； 2、高速（冷冻）离心机 1×104-2.5×104rpm，相对离心力104~105g,用于细胞碎片、较大细胞器、大分子沉淀物等分离； 3、超速离心机 转速2.5-8×104rpm，相对离心力5*105g；用于DNA、RNA蛋白质、细胞器、病毒分离纯化；检测纯度；沉降系数和相对分子量测定等。;根据结构分管式离心机（tubular bowl centrifuge）或圆筒式离心机 ，其转速高达20000r/min 但处理能力小（因沉降面小） 。。操作过程中，料液从圆管一端的中心流入，在离心力的作用下，管内液面基本上是以旋转轴为中心的圆桶面，从另一端的中心排出轻相。 ??? 碟式离心机（disc-type bowl centrfuge）或板式离心机 ，离心转子中有许多碟行分离板，以增大沉降面积，提高处理能力，转速为10 000r/min。操作过程中，料液从中心进料口输入，通过转子底部的液孔进入分离板外径处，进入分离板的间隙。 ;1）斜角式离心机 是一类结构最简单的实验室常用离心机， 指离心管腔与转轴成一定倾角的转子； 角度越大，沉降越结实，分离效果越好， 角度越小，颗粒沉降距离短，沉降速度快，但分离效果差。 颗粒在角转子中沉降时， 先沿离心力方向撞向离心管， 然后再沿管壁滑向管底， 因此管的一侧会出现颗粒沉积。;1）斜角式离心机;2）平抛式离心机 平抛式离心机一类结构简单的实验室常用的低中速离心机，转速一般在 3000-6000rpm。 转子活动管套内的离心管，静止时垂直挂在转头上，旋转时随着转子转动，从垂直悬吊上升到水平位置（约200—800rpm）。 颗粒在水平转子中的沉降是沿管子轴向移动。 样品便于收集 受振动和变速搅乱后对流现象小， 但转头结构复杂，最高转速相对要低 容量也小一些。  ;平抛式离心机转子;３）管式离心机 （tubular-bowl centrifuge）;管式离心机;管式离心机特点： 结构简单， 可提供较大离心力，转速高，分离因