农业研究论文灵芝发酵豆渣培养条件优化.PDFVIP

中国月期刊咨询网 农业研究论文灵芝发酵豆渣培养条件优化 据统计，中国每年豆渣产量在2000万t左右，如此大量的豆渣利用是一个难题[1]。研究表明，干豆渣中含20%左右的 蛋白质，50%左右的膳食纤维素，10%左右的脂肪，以及丰富的钙、磷等矿物质元素和维生素，其中含有的膳食纤维 素已被称为第七种营养素，可以预防结肠癌、胆结石、降低胆固醇、预防由冠状动脉硬化引起的心脏病，降低糖尿病 人的血糖水平，是一种优质的保健食品原料，同时，豆渣来源广泛，价格低，开发保健食品具有广泛的应用前景[2， 3]。为此，以豆渣为固体培养基培养灵芝，研究最佳发酵条件，为豆制品加工副产物利用提供理论依据。 验研究了发酵时间、接种量、培养温度及蔗糖添加量对灵芝菌丝生长和发酵豆渣多糖含量的影响，并用正交试验优化 了发酵条件。结果表明，蔗糖添加量1.0%、接种量12%、培养时间12d、培养温度27℃条件下发酵豆渣多糖含量最高 。 关键词：赤灵芝[Ganodermalucidum（Curtis∶Fr）P.Karst],豆渣,多糖,培养条件,农业研究论文 1材料与方法 1.1材料 赤灵芝菌种，购于华中农业大学食用菌研究中心。豆渣，市售。 1.2方法 脂17g，去离子水1000mL），分装于试管，121℃灭菌20min，摆斜面，备用。 液体培养基：PAD培养基（土豆200g，葡萄糖20g，蛋白胨5g，KH2PO41g，MgSO4·7H2O0.5g，去离子水1000mL）， 分装于250mL三角瓶内，120mL/瓶，121℃灭菌20min，备用。 1.2.2菌种的制备 1）菌种活化。在无菌条件下，从原始菌种斜面上挑取0.3cm×0.3cm大小菌块，转接至斜面培养基，置于培养箱中30 ℃培养5～7d，菌丝长满斜面后备用。 2）液体种子的制备。在液体培养基中接入3块黄豆粒大小的赤灵芝活化菌种，于150r/min旋转式摇床30℃培养5d，备 用。 3）赤灵芝发酵豆渣工艺流程。新鲜豆渣→复配→灭菌→冷却→接种→发酵。将50g豆渣装入100mL的三角瓶中，压实 ，121℃下灭菌20min，冷却后无菌条件下接种。 1.2.3豆渣发酵条件的优化 、4.0%，控制温度27℃，接种量8%，培养10d，通过感官评价及多糖含量确定豆渣发酵的最佳蔗糖添加量；②接种量 对豆渣发酵品质的影响试验。吸取1、2、3、4、5、6mL的菌液于灭过菌的豆渣培养基中，即接种量分别为2%、4%、 6%、8%、10%、12%，培养温度27℃，蔗糖添加量2%，培养10d，通过感官评价及多糖含量确定豆渣发酵的最佳接种 量。③培养温度对豆渣发酵品质的影响试验。在蔗糖添加量2%，接种量8%，培养温度分别设定为21、24、27、30、3 3℃的培养箱中培养，培养10d，通过感官评价及多糖含量确定豆渣发酵的最佳温度；④发酵时间对豆渣发酵品质的影 响试验。蔗糖添加量2.0%，培养温度27℃，接种量为8%，发酵时间分别为4、6、8、10、12、14d，通过感官评价及多 糖含量确定豆渣发酵的最佳接种量。 2）豆渣发酵最佳条件正交试验。试验根据单因素试验结果，每个因素选取3个水平，通过4因素3水平的正交试验（表 1）分析比较发酵豆渣中多糖含量，确定最佳发酵条件。 中国月期刊咨询网 1.2.4指标测定 1）发酵豆渣的感官评定方法。主要针对其外观、质地及风味3个方面属性进行评定（表2）。计算公式：感官评定得 分=外观得分×0.4+质地得分×0.3+气味得分×0.3。 置于15mL的试管中，加去离子水补足1.0mL，分别加入5%的苯酚1.0mL，然后快速加入5.0mL硫酸（与液面垂直加入， 勿接触试管壁，以便与反应液充分混合），静置10min。使用涡旋振荡器使反应液充分混合，然后将试管置于30℃环 境中反应20min，在490nm波长处测吸光度。以葡萄糖浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，制作标准曲线（图1）。②样 取2h，离心分离后再按料液比1∶4加入去离子水提取2h，合并两次提取液。吸取提取液0.5mL加入3倍体积的95%的乙 待测。吸取0.1mL待测样品，按上述步骤操作，测A490nm，以标准曲线计算多糖含量。 2结果与分析 2.1单因素试验结果 2.1.1发酵条件对发酵豆渣感官质量的影响由图2可以看出，发酵温度、接种量、蔗糖添加量和培养时间对豆渣的发酵 都有影响，发酵温度在27℃时灵芝菌丝粗壮细密，感官评价最好，温度过低菌丝生长速度慢，温度过高菌丝生长细弱 ，