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产淀粉酶的芽孢杆菌_筛选-
从土壤中分离产淀粉酶的
芽孢杆菌;巩固微生物分离纯化、细菌保藏等技能,对所学习过的微生物学实验方法进行综合技能训练; 1、富集培养基: 10g的可溶性淀粉,蛋白胨10g,
酵母膏 3g/L、Nacl 2g、
蒸馏水1000ml
(2倍浓缩100ml/500ml锥形瓶)
2、淀粉培养基:可溶性淀粉2g/L蛋白胨10g/L
牛肉膏3-5g/L
NaCl5g/L PH7.2—7.4 ;实验材料;;;1、取10g土壤加入250ml烧杯中,再加入90ml无菌水,充分震荡,制成土壤混悬液。
2、在37摄氏度摇床(200r/min)培养箱中培养2~3个小时,使菌体充分扩散到无菌水中。
3、在80 ℃水浴锅中加热10~15分钟,杀灭菌体,使芽孢得到富集.
4、静置,取上清至富集培养基的锥形瓶中。在37摄氏度摇床(200r/min)培养箱中培养一天,使菌体富集且产生大量芽孢。
;
将富集后的芽孢菌??上清分别稀释 101、102、103、104、105 、106、107倍,分别取102 、104 、105 、106、107菌液0.1ml均匀涂布在10个淀粉培养基上,在37摄氏度培养箱培养2天,平板培养基表面便形成了若干分散的单菌落。
;在单菌落处滴加碘液,挑取有透明圈的单菌落划线分离,在37的培养箱中培养2天。 ;鉴定
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