slr0664）TA系统的反馈调控作用.pdfVIP

一 ??一? 江苏农业科学 ????年第 ??卷第?期? 孙亮华，刘帅兵，赵卫飞．集胞藻 ?????∞ 染色体上 ??????????????／?????????系统的反馈调控作用???．江苏农业科学，????，?????：??— ??．? 集胞藻 ???????染色体上 ?????????????????????????? 系统 的反馈调控作用? 孙 亮华 ，刘 帅兵 ，赵卫 飞? ?江苏大学环境与安全工程学 院，江苏镇江 ???????? 摘要 ：细菌染色体上 的毒素 一抗毒素 ??????— ?????????，???系统通 过转录水 平和转 录后水平调控 毒素 活性 ，从 而? 控制细胞的生长速度和死亡 ，使细菌适应各种环境胁迫。为了证明集胞藻 ????????染色体上 ?????????系统的转录? 调控 ，构建 了以无启动子 的卢一半乳糖苷酶??????基因为报告基因的重组质粒 ，并测定 含转 录融合 重组质粒 的大肠 杆? 菌细胞的 卢一半乳糖苷酶活性 。结果表 明，抗毒素 ????能显著抑制 ??????启 动子 的转 录活性 ，而毒素 ?????能部分减? 弱这种抑 制作用 ，提示 ??????系统 的编码产物对该操纵子具有反馈调控作用 。? 关键词：集胞藻；染色体 ；毒素 一抗毒素系统；??????；转录调控 ；转录融合重组质粒? 一半乳糖苷酶活性? 中图分类号 ：????? 文献标志码 ：?? 文章编 号 ：????— ????????????— ????— ??? 毒 素 一抗毒 素系统 ??????— ????????????????，???由位 于? ??????、溴化 乙锭 ????、各类抗 生素 、分 子生物学 试剂 等 ，? 同一操 纵 子 中的抗 毒素 基 因和毒素 基 因构成 ，二 者共 同表? 均购 自宝生物 ?大连?有限公 司。引物合成及 ???测 序 由上? 达? 。其中抗毒素基因编码不稳定的抗毒素蛋白，毒素基因? 海生工生物工程技术服务有限公 司完成 。? 编码稳 定的毒素蛋 白；抗 毒素基 因编码的毒素蛋 白可被依赖? ?．?．? 仪器 主要 仪器 有 ：????????????型 ???仪 ??????—? ???的蛋 白酶降解成不稳定 的抗毒素蛋 白，与毒素 蛋 白相互? ????，???型分光光度计 ，??一????型稳 流稳 压 电泳仪 ，???? 作 用形成 ??复合体 ，可抑制毒 素的细胞毒性 。??蛋 白复合? 一 ????型气浴恒温振荡器 ，???一?数字式超级恒温浴槽等。? 体 可以通过抗毒素蛋 白结合于???系统 中启动 子的调控序列? ?．? 试 验 方 法? 上 ，从而反馈调控 ??系统 的转 录? 。细菌染色体上的 ??系? ?．?．? 菌株