谷子十里香抗锈抑制消减杂交文库构建及初步分析 (1).pdfVIP

?? ?? ?? ?? 帅¨ 雌刖 ??????潮??? 华 北 农 学 报 · ????，?????：?????????? ???：??．????／?????．????．??．???? 谷 子 十 里香 抗锈 抑?制 消?减 杂 交 文库构 建及 初 步 分 析? 李志勇?，贾丽霞?，董? 立?，王? 楠?，白? 辉?，全建 章?，刘? 磊?，董志平? ??．河 北 省 农 林 科 学 院 谷 子 研 究 所 ，河北 省 杂粮 重 点 实 验 室 ，国 家谷 子 改 良 中心 ，河 北 石 家 庄 ??????? ?．河 北 工 程 大 学 ，河 北 邯 郸 ???????? 摘要 ：为 了研究十里香抗锈分子机理及其调控机 制。以谷 子抗 锈十里香 接种 ??，??，??，??，????叶片 为材 料 ，利? 用 抑 制 差 减 杂 交 技术 ，构 建 了 谷 锈 菌诱 导 的 ???文 库 ，筛 选 十里 香 接 种 与 未 接 种 锈 菌 差 异 表 达 的 基 因 片段 ，通 过 ???．? ????进 行 同源 比对 ，对 差 异 表 达 基 因 进 行 功 能 注 释 ，并 利 用 荧 光 定 量 ???技 术 对 部 分 差 异 表 达 片段 进 行 表 达 分 析? 随 机 挑 取 差 减 文 库 中 阳性 克 隆 测 序 ，共 获 得 ???个 ???序 列 ，插 入 片 段 大 小 为 ???～??????，通 过 网 上 ???????非 冗 余? 数 据库 比对 分 析 ，发 现 其 中 ??个 ???与 抗病 相关 。对 与抗 病 相 关 的 ???分 析 ，推 测 ???? 转 录 因 子 、????信 号途? 径 、钙 信 号 途 径 、谷 胱 甘 肽 一??转 移 酶 、细 胞 色 素 ????、病 程 相 关 蛋 白 等 可 能 参 与 了 十 里 香 与 谷 锈 菌 非 亲 和 互 作 。进 一? 步 利 用 荧 光 定量 ???技 术 对 ??? 文 库 中 ?个 基 因做 了表 达 分 析 ，结果 表 明 这些 基 因均 受 锈 菌 诱 导 表 达 。通 过 构 建 十? 里 香 受