关岭牛MyoD I基因启动子报告质粒的构建及活性验证.pdfVIP

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2017-04-25 发布于未知
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关岭牛MyoD I基因启动子报告质粒的构建及活性验证.pdf

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基因组学与应用生物学，?叭?年，第 ??卷，第 ?期，第 ???—???页? ????????????????????????????，??????，???．??，??．?，???— ???? 研究报告? ???????????????? ? ?????????基因启动子报告质粒的构建及活性验证? 李飞?，? 许厚强 ?? 陈伟 ? 陈祥 ? 刘敏?，? 桓聪聪? ?贵州?大学生命科学学院，贵阳，??????；?高原山地动物遗传育种与繁殖省部共建教育部重点实验室，贵州?大学动物科学学院，贵阳，??????? 通讯作者???????????????????．???? ??? 要为了克隆关岭牛 ??????基因启动子并验证其启动活性，根据 ???????中牛的 ??????基因序列设计? ???引物，用 ???技术扩增牛 ??。???基因的启动子，构建重组克隆载体 ????????????；并通过 ???扩增、? 限制性酶切、测序及生物信息学分析对阳性克隆进行鉴定；构建报告质粒 ???????????，并将其转染小鼠? ?????、??????细胞系，检测其 ????后的双荧光素酶活性。实验结果获得了关岭牛 ??????基因启动子，其序列? 长度为 ??????，并成功构建了 ??????启动子报告质粒；双荧光素酶活性检测表明 ????一??????在小鼠 ?????? 细胞中的表达是 ????空载体 ??．??倍，在小鼠 ???一??细胞中的表达是空载体的 ?．??倍，??????启动子在小? 鼠 ?????细胞中的表达高于 ???一??细胞?料 ???．???。结果表明关岭牛 ??????基因启动子具有启动活性，在小? 鼠骨骼肌细胞中特异性表达。? 关键词 ??????基因，启动子，荧光素酶??????，???一??? ????????????????????????????????????????????????????????????????????????? ????????????????????????????????? ???????’? ???????????? ?????? ??? ??????????。 ????? ??? ?????????????? ?????????????????????????，??????????????????，???????，??????；??????????????????????????????????，????????????????????????????????????????? ??????????????????，? ????????????????????，??????????? ????????????，??????????????????，???????，??????? ????????????????????，??????????????????