EVOSFLAuto成像系统观察创伤愈合过程中的细胞分裂和迁.PDFVIP

应用指南 EVOS FL Auto 成像系统 EVOS FL Auto 成像系统 观察创伤愈合过程中的细胞分裂和迁移 应用简介 EVOS? FL Auto成像系统是一款全自 动的倒置多通道落射荧光和透射光数 字成像系统，具有极佳的流程效率。 该系统旨在满足广泛应用领域的各种 高要求，支持高分辨率图像无缝拼 接、自动化多位置多孔板扫描、自动 细胞计数和延时成像研究等。 延时成像是一项功能强大的技术，可让研究人员观察一较长时间段内的细胞事 材料 件及形态，使科学家们可以利用显微镜对细胞或细胞群的时空变化进行研究。 ? Gibco?人皮肤成纤维细胞，新生儿 此外，在整个过程中保持细胞健康生长环境也是数据采集的关键，利用EVOS? (C-004-5C) 载物台式培养箱，延时成像可以轻松显示较长时间内的细胞迁移、细胞分裂和 ? EVOS?载物台式培养箱 (AMC1000) 创伤愈合等，同时保持细胞健康和功能。 ? CellTracker? Red CMTPX (C34552) 在创伤愈合过程中，采用图像无缝拼接扫描可以生成整个创面图像，而且将扫 ? Gibco?培养基106 (M-106-500) 描实验方案保存至EVOS FL Auto成像系统中，研究人员还可以返回并扫描相同 ? Gibco?低血清生长添加剂 (S-003-10) 的区域，观察整个创伤的愈合过程。在EVOS FL Auto成像系统上采用检测分析 软件可以计算新鲜创面的面积。 在本应用指南中，将EVOS FL Auto成像系统与Gibco?原代细胞、Molecular Probes?检测试剂及EVOS载物台式培养箱结合使用，观察在70个小时创伤愈合 分析中新生儿人皮肤成纤维细胞(HDFn)的分裂和迁移，在此过程中，细胞不断 分裂并迁移，填充创面。本应用指南还显示了创伤开始以及愈合24和48小时， 整个创面的图像无缝拼接扫描，利用EVOS FL Auto成像系统的检测功能，研究 人员可以准确测量整个创伤面积。 实验方法 A B C 细胞培养及实验条件：HDFn细胞在35 mm六孔板中培养至 融合状态，使用1 μM CellTracker? Red CMTPX标记，用20 μL 移液器吸头在细胞上进行划痕实验。 Time = 0 hours Time = 8 hours Time = 18 hours 延时成像：采用配有有EVOS载物台式培养箱的EVOS FL D E F Auto成像系统的延时功能，利用10x物镜进行70小时延时 成像，每2小时采集一次Texas Red通道的图像。 图像无缝拼接扫描：在创伤开始以及愈合24和48小时，采 Time = 26 hours Time = 34 hours Time = 42 hours 用EVOS FL Auto成像系统中的延时功能，利用4x物镜对整 G