生物类课程实验教学指导书.doc

PAGE 1 -PAGE 125- 第一部分 生物学基础实验 实验一 细胞的显微与亚显微结构观察 一、相关基础知识 生物体的一切生命活动，都是以细胞作为基本结构和功能单位来进行的。由于其内在结构和自身表面张力以及外部机械压力，细胞表现具有不同的形态，有圆球形、圆盘形、肾形、多边形、纺锤形等。更重要的是，细胞的形态与其功能密切相关，如红细胞是圆盘形的，有利于其在血管内流动及气体交换；肌细胞按收缩方向是细长的纤维状结构，适于细胞的收缩运动。精子细胞核小，具有一条能运动的尾或鞭毛，以利于其受精过程；植物表皮的保卫细胞是肾形的，似两扇大门、通过对不同细胞形态的观察，可以了解执行不同生理功能的细胞所具有的不同形态，同时还可以认识执行同一功能的细胞具有不同形态，甚至同一种细胞在不同发育时期也呈现不同形态。 虽然形形色色的细胞组成了千奇百怪的生物世界，但细胞却具有共同的基本结构，即细胞膜、细胞质和细胞核。这些基本结构不是模式化的，只有对具体的细胞进行分析观察，才能正确认识和了解细胞的结构。 细胞的许多结构在自然状态下几乎是无色的，观察时，必须经过染色步骤。不同的结构与不同的染料有特异性结合，使细胞的不同部位染上不同深度或不同种的颜色，并产生不同的折射率。将细胞内部各部分的构造显示得更清楚。 一般的生物染料不能穿透细胞膜，只有当细胞被化学试剂固定（杀生）后，膜结构被破坏，染料才能进入细胞内部，附着在被染结构上，显示其染色作用。因此，我们称固定剂有“煤染”作用。但有一些‘活体染料”却能进入活细胞，它们是一些无毒或毒性很小的染色剂。在电化学作用下，染料堆积在细胞中某些特定的位置上，从而染色，如中性红染液泡系、健那绿染线立体等。 活体染色的方法有体内活染和离体活组织染色两种，体内活染通常是将染料用注射、吸收或吞咽等方法进入生物有机体内进行染色。染色以后，不影响细胞的生命活动，不产生任何理化变化。离体活组织染色是指对已离体的活组织或细胞，置于相对能保持活性的培养液中，使其保持生活状态，再进行染色的方法。 活体染色的目的是显示活细胞的某些结构，用来研究生活状态下的细胞结构和生理病理状态。 二、实验目的和要求 观察各种组织细胞的切片，注意联系细胞的形态与功能的关系。 学习一些细胞器的超活染色技术，观察植物活细胞内线粒体和液泡系的形态、数量与分布。 三、实验材料与仪器 1、实验材料 （1）洋葱鳞茎内表皮； （2）黄豆根尖； （3）动植物组织标本。 2、器材 显微镜 刀片 小剪刀 尖头镊 载玻片 盖玻片 擦镜纸 吸水纸 吸管等 试剂 中性红（1／3000） 健那绿（0.5％） 蒸馏水 四、实验方法与步骤 1、观察动植物不同组织的切片 单层扁平上皮；多边形或不规则波浪形．彼此边缘紧密镶嵌。 单层柱状上皮：核柱形细胞，形状高细，排列紧密，似木栅栏状。 纤毛上皮：假复层柱状细胞。是由一层不同形状、不同高度的细胞构成。由于细胞大小不同，核不在同一水平位置上，故称为假复层。 骨骼肌：长圆柱状细胞，内有大量卵圆形细胞核，在肌膜下排成一行，为典型多核细胞。 平滑肌：长棱形细胞，中央有一圆形核。 脂肪细胞：圆形细胞，脂滴占据大部分容积。 软骨细胞：陷在软骨陷窝内的大小不等的圆形细胞。 人血涂片：观察不同核形的白细胞及双凹面形红细胞。 鸡血涂片：卵圆形细胞，与人血涂片比较其胞形、核形。 运动神经元涂片；不规则形细胞，胞体为三角形或多边形。突起由胞体不规则延伸。 精巢切片；观察精巢内精细胞在不同发育阶段的不同形态。 洋葱根尖；观察根尖的形态、区分根冠区、分生区、伸长区的不同形态细胞。 2、黄豆根尖细胞液泡系的活染及观察 取一干净载片，中央滴一滴中性红染液。用刀片将初生的黄豆根尖切一纵切薄片，置染液中，染5-10min。用吸管吸取蒸馏水，滴在染液周围，使染液冲淡近无色。此时，轻轻盖一干净载片，用吸水纸吸去多余水分。先观察分生区细胞，寻找染成红色的圆形小泡，即初生液泡。由分生区向伸长区观察，寻找体积增大的液泡。 3、洋葱表皮细胞线粒体的活染及观察 取一干净载片，中央滴一滴健那绿染液。用尖头镊从洋葱鳞片内撕下一小片表皮，平铺在染料上，勿使有气泡、染5～10min。用吸管吸蒸馏水洗去染液，盖片．吸去多余水分。观察胞质中被染成蓝、绿色的颗粒，即线粒体。 五、作业与讨论 完成实验报告。 回答下列问题：显微镜观察为什么要染色？活体染色与常规染色的异同点在何处？ 实验二 线粒体和液泡系的超活染色与观察 一、实验目的 观察植物活细胞内线粒体、液泡系的形态、数量与分布