HPLC法测定舒筋接骨片中血竭素的含量的论文.docVIP

　　HPLC法测定舒筋接骨片中血竭素的含量的论文 作者：王修彬,张建文,蔡秀珍,王志潭,丁秀芳 【摘要】 目的 测定舒筋接骨片中血竭素的含量,以控制该制剂的质量。方法 以血竭素为指标,采用高效液相色谱法对制剂中的血竭素进行含量测定。结果 血竭素在1.53～7.66 μg范围内线性关系良好,r＝0.999 9,平均回收率为98.64%,rsd＝1.12%。结论 采用本法测定舒筋接骨片中血竭素的含量方法简便、快速、重复性好,适用于该制剂的质量控制。 【关键词】 舒筋接骨片；血竭素；高效液相色谱法；含量测定 abstract：objective to control the quality of shujin jiegu tablets by determining the content of dracorhodin in the preparation by hplc. method ined by hplc. results dracorhodin shoethod is simple, rapid, repeatable, and applicable to the quality control of the preparation. key ination 舒筋接骨片是本院应用多年、疗效确切的自制品种,该制剂由血竭、鹿茸、乳香(制)、没药(制)、骨碎补、鹿角霜、鸡血藤等中药组成,具有活血祛瘀、舒筋通络、补益肝肾、接骨续筋的功效,临床用于跌打损伤、外伤骨折。.为保证本品疗效,有效控制其质量,我们对其质量标准进行了研究,建立了该制剂中血竭素的高效液相色谱测定法。 　　1 仪器与试药 岛津lc-at高效液相色谱仪,spd-10a型控制器,紫外检测器,n-2000色谱工作站(浙江大学智能信息工程研究所)。十万分之一电子分析天平(梅特勒公司提供),超声波处理器(上海必能信仪器有限公司提供)。色谱柱：kromasil c18(4.6 mm×25 mm,5 μm)。 　　舒筋接骨片(批准文号：鲁药制字z0720030113,潍坊市中医院制剂中心提供,批2006120320070501)；血竭、鹿茸、乳香(制)、没药(制)、骨碎补、鹿角霜、鸡血藤等中药购于潍坊海王中药饮片有限公司；对照品：血竭素高氯酸盐购于中国药品生物制品检定所(批号110811-200203)；所用试剂为色谱纯或分析纯。 　　2 方法与结果 　　2.1 色谱条件 参考2005年版《中华人民共和国药典》(一部)血竭项下含量测定的条件和其他资料中的条件,血竭素的测定以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂色谱柱。以440 nm作为检测波长,柱温40 ℃[1-3]。以乙腈-0.1%磷酸(25：75)为流动相；理论塔板数按血竭素峰计算应不低于4 000。 　　2.2 线性关系的考察 精密称取血竭素高氯酸盐对照品2.11 mg,置10 ml棕色量瓶中,加3%磷酸甲醇溶液溶解,并稀释至刻度,摇匀,吸取上述对照品溶液0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 ml,置于10 ml棕色量瓶中,加3%磷酸甲醇溶液至刻度,摇匀。分别吸取不同浓度的对照品溶液,注入液相色谱仪,如法测定。以对照品浓度对峰面积进行线性回归,得回归方程：y＝53 682.9x-683.1,r＝0.999 9。 　　2.3 空白对照试验 供试品溶液的制备：取本品5片(批,研细,取0.5 g,置具塞锥形瓶中,精密加入3%磷酸甲醇溶液50 ml,称重,超声处理5 min,称重,加3%磷酸甲醇溶液补充减失的重量,摇匀,滤过,续滤液置于棕色瓶中,即得。 对照品溶液的制备：精密称取血竭素高氯酸盐对照品1.55 mg,置10 ml棕色量瓶中,加3%磷酸甲醇溶液溶解并稀释至刻度,摇匀,再精密吸取1 ml,置25 ml棕色量瓶中,加3%磷酸甲醇溶液稀释至刻度,混匀,即得(血竭素＝血竭素高氯酸盐/1.377)。 阴性对照溶液的制备：取阴性对照品(缺血竭),同供试品溶液的制法制成阴性对照溶液。 吸取对照品溶液、供试品溶液、阴性对照品溶液各20 μl,分别注入液相色谱仪,按确定的方法检测。结果供试品溶液在与对照品相同的保留时间处有相同的血竭素峰,而阴性对照品没有,说明测定的专属性好。色谱图见图1。 　　2.4 精密度试验 吸取对照品溶液20 μl,如法连续测定5次,测得峰面积,结果rsd＝0.31%,说明此法测定的精密度较高。 　　2.5 稳定性试验 　　取供试品(批溶液,每隔2～4 h测定1次,共测定5次,结果供试品溶液在12 h内稳定性较好,rsd＝0.60%。 　　2.6 重复性试验 取本品(批号200