丹酚酸B干预内皮祖细胞对骨髓间充质干细胞向心肌分化早期基因表达的论文.docVIP

　　丹酚酸B干预内皮祖细胞对骨髓间充质干细胞向心肌分化早期基因表达的论文 【摘要】 目的 探讨中药丹酚酸b预处理的内皮祖细胞（epcs）对急性心肌梗死(ami)大鼠移植骨髓间充质干细胞（bmscs）向心肌分化早期基因表达的影响。方法 密度梯度离心法和贴壁筛选法培养、纯化epcs与bmscs；免疫细胞化学法（cd34/cd133/cd44）分别鉴定两种细胞。结扎大鼠左冠状动脉，制作大鼠ami模型，42只大鼠随机分为假手术组，模型组，bmscs组，epcs+bmscs组，其中治疗组用丹酚酸b最佳药物浓度处理的epcs与bmscs混合，在大鼠ami区周边分五点注射。rtpcr检测心肌分化早期基因nkx2.5、gata4表达。结果 细胞移植4 scs组心肌nkx2.5、gata4表达量分别为2.256±0.524和1.567±0.287，与对照组比较差异显著。结论 丹酚酸b预处理的epcs联合bmscs的移植上调了bmscs向心肌分化过程中nkx2.5、gata4基因的表达，对心肌细胞的数量增加有重要影响，从而有可能改善心功能。 【关键词】 丹酚酸b；急性心肌梗死；内皮祖细胞；骨髓间充质干细胞；细胞移植 effect of endothelial progenitor cells preconditioned esenchymal stem cells differentiation toyocardial cells 　　li qingent of health exercise science, tianjin institute of physical education, tianjin 300381, china 　　【abstract】 objective to investigate the effect of salvianolic acid b preconditioned endothelial progenitor cells bined esenchymal stem cells on gene expression in rats′ models of acute myocardial infarction(ami). methods cultivation and purification of epcs and bmscs in vitro ethod, and munofluorescence and immunocytochemistry (cd34/cd133/cd44). the rat model of ami ly by model, sham, bmscs and epcs bined scs groups, and epcs preconditioned scs ia area. after 4 ined by realtime pcr. results the expression of nkx2.5 and gata4mrna arkably pared scs transplantation can increase the expression of nkx2.5 and gata4, prove the cardiac function. 　　【key esenchymal stem cells (bmscs); acute myocardialin infarction (ami) 　　移植的干细胞能在受损心肌部位分化成为新的心肌样细胞〔1，2〕，而骨髓间充质干细胞（bmscs）因自体来源，取材容易，扩增能力强，成为研究热点。.目前研究主要集中在通过药物诱导来提高间充质干细胞（mscs）移植后的存活和定向分化〔3，4〕。本文前期的研究结果表明丹酚酸b(salb)可以减小心肌梗死的面积〔5〕,促进心脏功能的恢复。内皮祖细胞(epcs)是血管内皮的前体细胞，移植后促进缺血性疾病的血管再生和侧支循环建立已被证明〔6〕。因此本文采用salb预处理epcs，与bmscs联合移植，观察急性心肌梗死（ami）大鼠模型bmscs向心肌细胞分化过程中早期基因nkx2.5、gata4的表达情况。 　　1 资料与方法 　　1.1 材料 ldmem (美国gibco公司)；特级胎牛血清（美国hyclone公司）；血管内皮生长因子（vegf）,碱性成纤维细胞生长因子（bfgf），纤维连接蛋白(r＆d公司)；大鼠单个核细胞分离液（天津灏洋）；5％co2恒温培养箱（model tc2323 co2 incubator）；cd34兔多克隆抗体，cd44兔多克隆抗体(武汉博士德），cd133兔多克隆抗体（天津灏洋）；salb（天津天士力现代中药资源有限公司，批；