动物细胞培养生物学知识点.pptVIP

细胞工程;组成人及哺乳类动物机体的细胞具有极其复杂的结构和功能，细胞在机体内生长时相互依赖、相互制约，在神经体液的调节下形成了一种天然的内环境，体外生长时脱离了这些内平衡系统，与机体内细胞相比不完全相同。 细胞体外生长时，有其特有的生长类型、特点、过程和所需的生长条件。 ;第三章 动物细胞培养的生物学知识;第一节 体外培养细胞的生长方式和类型;1. 贴壁生长型细胞;1. 贴壁生长型细胞;此型细胞外形与体内成纤维细胞形状相似，细胞大致呈梭形或不规则形。 起源于中胚层的细胞在体外培养时一般表现为这种形式。 人胚肺细胞在显微镜下观可观察到典型的成纤维细胞型。;此型细胞形状上类似上皮细胞，扁平状，形态较为规则，细胞贴壁后呈三角形及不规则偏平的多角形，中央有扁圆形核，生长时彼此紧密连接成单层细胞。 起源于内胚层与外胚层的细胞在体外培养时都可能呈现上皮型。 血管内皮细胞、Hela宫颈癌细胞在显微镜下可呈现典型的上皮细胞型。;此型细胞具有类似巨噬细胞样的特征：在支持物上分散生长，一般不连接成片、形成群落；细胞胞质常伸出伪足和突起；在培养皿壁上生长位置不固定，呈活跃的游走和变形运动，速度快且方向不规则；细胞内易出现色暗的吞噬性颗粒。 表现此类细胞形态的主要是具有吞噬作用的单核巨噬细胞系统的细胞和肿瘤细胞。;此型细胞形态上不规则，一般分为胞体和胞突两部分，其中胞突为细长形，类似丝状伪足；胞体虽然也略呈多角形，但没有成纤维细胞那样不规则。 此类细胞不常见，只有某些神经组织细胞等那以确定其稳定形态的才归入多形细胞。;上述四种细胞形态学形式是细胞体外培养最常见的、也是形态最明显的几种形式，体外培养时所谓的某型细胞，仅是因为其形态与体内的某种细胞类似，而不能将体外培养的这些细胞与体内同名的细胞完全等同，同时也不能说明培养细胞的起源。 在实际培养中，所培养的细胞并不一定呈现某一种典型的形态形式，而多呈现的是一些过渡性形态。 体外培养细胞的形态学特征受到多种培养条件的影响，因此，细胞形态学特征仅是对培养物判断或识别的一种参考性指标，不能用于确定某一培养物的确切细胞类型。;2. 悬浮生长型细胞;第二节 体外培养细胞的生长特点;1.贴附与伸展;;2.运动的接触抑制与生长的密度抑制;2.运动的接触抑制与生长的密度抑制;第三节 体外培养细胞的生长过程;1.细胞生长的全生命过程;1.细胞生长的全生命过程;细胞系 原代细胞经第一次传代后形成的能够继续进行传代培养的细胞群体称为细胞系，一般为有限细胞系。 原代培养后得到细胞系，再经多次传代培养后，一部分细胞死亡，一部分细胞继续生长并转化为连续细胞系或无限细胞系。 细胞株 从一个经生物学鉴定的细胞系经过克隆化或其他筛选方法获得的单一类型的细胞群体被称为细胞株。 ;2.每代细胞的生长过程;第四节 体外培养细胞的生长条件;1.无污染环境;2.温度;3.pH;4.气体环境;5.渗透压;6.营养;7.附着物;8.抑制物;第五节 体外培养细胞的监测（常规性检查）;第四节 体外培养细胞的监测（常规性检查）;1.微生物污染;2.培养液观察;3.细胞形态检查 ;4. 细胞计数;;用血细胞计数板进行细胞计数的步骤;;;用血细胞计数板进行细胞计数的步骤;5.细胞活性监测;I.染色排除法;结晶紫，细胞悬液同0.1％结晶紫（溶于Hanks液）混合后，立即镜???，着色的为活细胞。 ;