重庆医科大学细胞工程.docVIP

细胞工程(Cell engineering)按一定设计方案，在细胞、亚细胞或组织水平上进行实验操作，获得重构的细胞、组织、器官及个体，创造优良品种和产品的生物工程。主要以细胞为对象，以获得特定的细胞、组织产品或新型物种的综合性生物技术。 细胞培养(Cell Culture)是指从生物体内取出组织或细胞，在试管和培养平皿内模拟体内生理环境，于无菌、适当温度和一定营养条件下，使之保持一定的结构和功能，以便于我们观察、研究的培养技术 接触抑制(Contact inhibition)细胞在贴壁生长过程中，随着细胞分裂，数量不断增加，最后形成一个单层，此时细胞间相互接触，发生细胞生长和移动抑制的现象称接触抑制。是区别正常细胞与癌细胞标志之一。 密度抑制(Density inhibition)细胞密度到一定程度，培养液因营养消耗、代谢产物累积，导致细胞分裂停止 细胞周期概念（cell cycle）是指一个母细胞分裂结束后形成的子细胞开始至下一次,再分裂结束形成2个子细胞终止所经历的全过程。Or是指细胞从第一次分裂结束产生新细胞到第二次分裂结束所经历的全过程，可分为间期和分裂期（M期）。细胞周期 = 分裂间期+分裂期 = G1期 + S期 + G2期 + M期 传代**：当细胞增殖到一定程度，将细胞分开接种到多个新的培养瓶，使之继续培养称传代。 生长曲线(Growth curve）每次传代接种后，细胞的这些生长增殖过程，若进行检测计数，绘制成曲线，叫生长曲线。各细胞的生长曲线各具特点，是该细胞生物学特性的指标之一。 原代培养***：即从供体获取组织后的首次培养。特点：1）细胞生物学特性未发生很大变化，最接近和反映体内生长特性，适合作药物测试和细胞分化等实验研究； 2）原代培养的细胞生长比较缓慢，而且繁殖一定的代数后停止生长，一般不超过60代 细胞株(Cell strain)***：通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或标志物的细胞称为细胞株 细胞系（cell line）：原代培养物经首次传代成功即称为细胞系，细胞系可泛指一般可传代的细胞 细胞活力测定**：是测定体外培养细胞中死、活细胞组成的方法，是肿瘤体外研究中应用最广的技术手段之一 转基因动物***(transgenetic animal)将特定的目的基因从某一生物体分离出来，体外进行扩增和加工，导入另一动物的早期胚胎细胞中，使其整合到宿主动物的染色体上，当胚胎被移植到代孕动物体内后，在发育过程中稳定表达或诱导表达，并通过生殖细胞稳定传给后代。这种在基因组中稳定整合有人工导入外源基因的动物称为转基因动物。 结扎雄鼠：结扎公鼠不能形成精子,与母鼠交配，能使母鼠产生阴道栓，产生母鼠假孕现象。 假孕母鼠**：结扎公鼠与母鼠交配，能使母鼠产生阴道栓且生殖系统的生理状态与受孕母鼠类似，从而为移植胚胎提供着床和继续发育的生理条件。这种母鼠称之为假孕母鼠。 基因显微注射****：借助显微操作仪，直接把外源基因注射到动物早期胚胎、胚胎干细胞、体细胞或卵母细胞中，使外源基因整合到宿主染色体，发育成转基因动物。 基因治疗(Gene Therapy)将外源功能性目的基因导入患者体内，通过调节其表达，从而抑制、替代或补偿受累细胞中的缺陷基因，恢复受累细胞、组织、器官的正常功能，达到疾病治疗的目的。 基因打靶(gene targeting )** 通过DNA分子的同源重组，特异性定点改变基因组中靶基因序列和结构，以研究目标基因的体内功能或相关疾病发病机制的一种基因操作技术 基因敲除(gene knock out )** 也叫基因剔除。是指运用DNA重组原理，使导入的外源基因与小鼠等靶细胞基因组中目的(靶)基因发生同源重组(又称定点整合)，致使内源目的基因发生全部或部分基因缺失，导致其功能散失。 基因替换 (gene knock in)** 是指运用DNA重组原理，使导入的外源基因与小鼠基因组中目的(靶)基因发生同源重组，致使内源目的基因编码区被外源基因的编码区替换。 动物生物反应器(Bioreactor) 一般把外源目的基因片段在器官或组织中表达的转基因动物叫动物生物反应器 动物乳腺生物反应器(Mammary gland bioreactor)利用哺乳动物乳腺特异表达的启动子元件构建转基因动物，指导外源基因在乳腺特异表达，从转基因动物乳汁获取重组蛋白 干细胞的基本概念：具有自我更新、高度增殖和多向分化潜能的细胞群体 胚胎干细胞 (embryo stem cell , ESC)：由胚胎内细胞团或原始生殖细胞经体外抑制培养而筛选出的细胞，具有发育全能性、体外培养无限增殖、自我更新和多向分化的特性。 成体干细胞（somatic stem cell or adult stem cells ）：指