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多指标综合评分法优化更年康颗粒醇提工艺的论文.doc
多指标综合评分法优化更年康颗粒醇提工艺的论文
【摘要】 :目的 优化更年康颗粒的醇提工艺。方法 采用正交试验设计,以芍药苷、黄芪甲苷含量为评定指标,用多指标综合评分法进行数据处理,优化提取条件。结果 更年康颗粒优化醇提工艺为18倍量70%乙醇,分3次回流提取,每次1.5 h。结论 该提取工艺合理,有效成分提取效率高。
【关键词】 更年康颗粒 芍药苷 黄芪甲苷 正交实验 综合评分法
abstract:objective to optimize the extraction technology for gengniankang granules. methods an orthogonal test ultiple guidelines grading method for optimizing the extraction condition. results the optimized extraction technology for gengniankang granules e of 70% alcohol should be added to 1 volume of the granules for 3 successive reflux extractions ized extraction technology ethods
更年康颗粒是在《景岳全书》归肾丸的基础上,根据辨证施治原理并结合临床实践筛选出来的,由白芍、枸杞子、熟地黄、黄芪、合欢皮、淫羊藿、钩藤等9味中药组成,具有滋肾养阴、平肝宁心的功效。.主要用于治疗妇女更年期潮热汗出、心烦失眠等症状。为减少药物用量及更好地发挥其功效,通过查阅文献,将方中的白芍、黄芪、合欢皮、钩藤4味药物进行乙醇提取,其余药物进行水煎煮提取。本试验就上述4味药物的醇提工艺,应用正交试验法,以芍药苷、黄芪甲苷含量为指标,采用综合评分法进行优选。
1 仪器与试药
lc-10advp型高效液相色谱仪(日本岛津公司);spd-6av紫外检测器(日本岛津公司);美国alltech公司500型蒸发光散射检测器;hettler toledo ag285);kq-500e型医用超声清洗器(昆山超声仪器有限公司)。
芍药苷对照品(中国药品生物制品检定所,批号110736- 200526);黄芪甲苷对照品(中国药品生物制品检定所,供含量测定用,批号110781-200512);中药材购自南京市药材公司,经南京中医药大学药学院生药教研室鉴定为符合2005版《中华人民共和国药典》规定药材。甲醇为色谱纯,其余所用试剂均为分析纯,均购自上海化学试剂有限公司;水为重蒸水(自制)。
2 方法与结果
2.1 正交设计
方中白芍为君药,其活性成分为芍药苷,可溶于醇类;黄芪、合欢皮主要成分为皂苷和多糖类物质,且这两部分均为活性成分,工艺中采用醇提取,可兼顾两部分成分;钩藤主要活性成分为各种吲哚类生物碱,主要有钩藤碱、异钩藤碱、柯诺辛因碱等,其在乙醇中有较好的溶解性,为充分提高生物碱的利用率,采用醇回流提取。故根据方中这4味药的主要化学成分的理化性质,以乙醇为提取溶媒,采用l9(34)正交表进行正交设计,对乙醇的浓度(b)、用量(a)、提取次数(c)、提取时间(d),用4因素3水平进行考察,以芍药苷、黄芪甲苷含量为考察指标,进行提取工艺最佳参数的确定。其提取工艺因素水平设计见表1。按处方配比取处方药材9份,每份45 g,按照因素水平表操作,加入乙醇,加热回流,过滤后将所得的滤液减压浓缩成稠膏。表1 因素水平表(略)
2.2 考察指标的测定
2.2.1 hplc法测定芍药苷含量
色谱条件:采用依利特hypersil ods色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相:甲醇-水(25∶75);流速:1 ml/min;检测波长:230 nm;柱温:30 ℃。
线性关系考察:精密吸取0.601 mg/ml芍药苷对照品溶液0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 ml,分别置于5 ml量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,使浓度分别为0.060 1、0.120 2、0.180 3、0.240 4、0.300 5 mg/ml。分别吸取上述各对照品溶液20 μl,进样,按上述色谱条件测定峰面积值,以峰面积均值(y )为纵坐标,进样浓度(x )为横坐标,绘制标准曲线。得回归方程:y=6 223 541.78x+38 695.056,r=0.999 8(n=5)。结果表明,芍药苷在0.060 1~0.300 5 mg/ml范围内呈良好的线性关系。
含量测定:取按各提取工艺制备的稠膏约0.2 g,精密称定,置离心管中,精密加入稀乙醇20 ml,称定重量,超声处理1
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