大黄对慢性肾功能不全大鼠保护机制的研究的论文.docVIP

　　大黄对慢性肾功能不全大鼠保护机制的研究的论文 【摘 要】 目的 观察大黄对慢性肾功能不全大鼠肾功能及肾组织tgf-β1和smad7表达的影响。方法 采用腺嘌呤法建立大鼠慢性肾功能不全模型，治疗组予以大黄（4 g/kg/d）灌胃。治疗4 周后，检测各组大鼠的24 小时尿蛋白定量、肾功能，通过组织学及蛋白印记观察肾组织tgf-β1和smad7的表达。结果 治疗组大鼠的24h尿蛋白定量、肾功能明显增加（p＜0.01），而治疗组大鼠24 h尿蛋白定量、肾功能较非治疗组减少（p＜0.05）。非治疗组大鼠肾组织tgf-β1、smad7表达较正常组明显增加（p＜0.01）。结论 大黄可降低慢性肾功能不全大鼠24 小时尿蛋白、肾功能水平，抑制肾组织tgf-β1和smad7表达。大黄对慢性肾功能不全的保护机制可能与降低肾脏tgf-β1和smad7表达有关。 【关键词】 大黄；慢性肾功能不全；腺嘌呤；转化生长因子-β1；smad [abstract] objective to study the effect of dai huang on glomerulosclerosis and expression of tgf-β1 and smad7 in rats ethods rats easured. the expression of tgf-β1 and smad7easured. results pared ad7. conclusion dai huang can diminish urine protein excretion and prevent glomerulosclerosis in subtotally nephrectomized rats. this protective effect is presumed to be associated ad7. [keyad7 大黄为蓼科植物掌叶大黄，现代药理学研究发现，大黄有抗血小板聚集、降血脂、清除氧自由基、提升超氧化物歧化酶(sod)的活性，减轻免疫炎症反应的功效，同事具有泻热通便、解毒消痈、行瘀通经功效。.我们通过观察大黄对慢性肾功能不全大鼠的治疗，观察其对尿蛋白排泄、肾功能的影响；并观察其对肾组织中转化生长因子β1（tgf-β1）、smad7的蛋白表达及肾脏病理变化的影响，探讨大黄对慢性肾功能不全的疗效及作用机制。 1 材料与方法 1.1 材料 湖北产中药材大黄。腺嘌呤(产品批号2007109)。兔抗tgf-β1、smad7抗体；en vision免疫组化试剂盒；bca试剂盒。 1.2 实验动物分组和模型建立 雄性sd大鼠60 只，7 周龄，体重190±20 g。适应性饲养1 周，随机分为正常组20 只和腺嘌呤组40只。腺嘌呤组每日腺嘌呤300 mg/kg灌胃，6 周后以代谢笼留取24 小时尿液，眶内静脉采血，测定24 小时尿蛋白定量、血尿素氮、血肌酐。检测发现全部造模成功。随机分为2 组：非治疗组20 只，治疗组20 只。治疗组大鼠每日给予黄葵胶囊[2 g/kg·d]灌胃，同时正常组和非治疗组给予等量生理盐水灌胃。4周后全部大鼠以代谢笼留取24 小时尿液，眶内静脉采血，测定24 小时尿蛋白定量、血尿素氮及肌酐。大鼠处死后取部分肾组织置于10％中性甲醛中固定，部分肾组织液氮保存用于蛋白印迹杂交方法（icro;m，行he染色，观察肾小球硬化及肾间质纤维化的程度。 1.3.3 蛋白印记分析 各组取约100 mg肾组织置于1 ml裂解缓冲液（含蛋白酶抑制剂pmsf 100ug/ul，aprotinin 1 ug/ml，leupeptin 1 ug/ml），匀浆后冰浴30 分钟，然后4 度12000 g离心20 分钟。提取蛋白后用bca法测量蛋白浓度。取等量蛋白质进行sds-聚丙烯酰胺凝胶电泳，半干法转移至聚氟乙烯膜上，封闭液封闭，加入1：200稀释的tgf-β1抗体，4 ℃过夜。0.05％tbst洗膜3 次，ecl显影。 1.4 统计学处理 计量资料采用均数±标准差表示，数据用spss 13.0软件包进行统计学处理。各组间均数比较采用单因素方差分析，p lt;0.05认为有统计学意义(方差齐时用lsd法、方差不齐时用tamhane法)。 2 结果 2.1 尿蛋白定量变化 非治疗组和治疗组大鼠尿蛋白排泄明显高于正常组(p lt;0.01)；治疗组大鼠尿蛋白定量与非治疗组比较有所降低(p lt;0.05)，见表1。 2.2 血清生化指标变化 非治疗组和治疗组大鼠血肌酐明显高于正常组(p lt;0.01)；治疗组大鼠血肌酐与非治疗组比较有所降低(p lt;0.05)；尿素氮变化同血肌酐变化，见表1。 表1