液相色谱-蒸发光散射-电喷雾离子阱质谱法测定硫酸异帕米星及其有关物质.pdfVIP

第 34 卷 分析化学 FENXIHUAXUE 研究报告 特刊 2006 年 9 月 ChineseJOurnaIOfAnaIyticaIChemistry Sl9 ~S22 液相色谱-蒸发光散射-电喷雾离子阶质谱法 测定硫酸异帕米星及其有关物质 王 建l!2 洪利妞2 倪坤仪＊l l 中国药科大学分析化学教研室 南京 2l0009 2 浙江省药品检验所 杭州 3l0004 摘 要 建立高效液相色谱-蒸发光散射检测 HPLC-ELSD 法测定硫酸异帕米星及其有关物质的含量 并采 用高效液相色谱-电喷雾离子饼质谱 HPLC-MSn 联用 鉴定硫酸异帕米星中的有关物质 采用岛津 ShimVP- ODS 色谱柱 流动相为 0.05 mOI/L五氟丙酸溶液-甲醇 65335 流速为 l.0 mL/min 漂移管温度为 50C 雾化 气体压力为 3.5 Xl05 Pa 在正离子检测方式下 用电喷雾离子饼质谱法对异帕米星中的杂质进行多级质谱分 析 异帕米星和杂质分离良好 异帕米星在 70 ~l830 mg/L的范围内呈较好的线性关系 rI0.9999 异帕 米星的重复性实验 RSDIl.2% 检出限为 ll mg/L 结合多级质谱裂解初步推断异帕米星中主要一个未知杂 质是异帕米星分子中 3 位 NH2 与异丝氨酸结合失去一个分子 H2 O所得的两分子异丝氨酸取代物 方法快 速 简便 结果准确可靠 重现性好 关键词 硫酸异帕米星 高效液相色谱法 蒸发光散射检测器 电喷雾离子饼质谱 1 引 言 硫酸异帕米星为氨基糖贰类抗生素新药 由日本抗生素基准解说及新药申报标准采用抗生素微生 物检定法测定 操作极其烦琐 测定误差较大 由于氨基糖贰类抗生素无紫外吸收 无法采用紫外检测 器 因此 通常采用衍生化的方法进行测定 l 2 但该法操作烦琐 费时 而且反应过程中可能会产生 一些副产物 干扰有关物质的测定 蒸发光散射检测器是一种新型的通用型质量检测器 ELSD的响应不依赖物质的光学特征 任何挥 发性低于流动相的物质均可被检测 对无紫外或紫外末端吸收的有机化合物的检测 显示出极大的优越 性 近年来陆续有文献报道用蒸发光散射检测器进行氨基糖贰类抗生素的质量分析 3 ~5 VOgeI等 3 在碱性流动相 pHl0.0 条件对异帕米星进行了分析 但存在碱性色谱柱寿命短 系统较难稳定等问 题 本研究建立了在酸性条件下 HPLC-ELSD法测定硫酸异帕米星有关物质和含量的方法 并经方法学 实验 简便 可行 在本品中检出一个含量为 6% ~7%的未知杂质 取名杂质 A 采用高效液相色谱- n 电喷雾离子饼质谱 HPLC-MS 法 鉴定了这个杂质 初步推断该未知杂质是异帕米星分子中 3 位 NH2 与异丝氨酸结合失去一个分子 H2 O所得的两分子异丝氨酸取代物 2 实验部分 2.1 仪器与试剂 ll00 高效液相色谱系统和 SEDEX75 型蒸发光散射检测器 美国 AgiIent公司 AgiIentll00 质谱 仪 包括电喷雾离子源 离子饼质谱检测器 美国 Dikma公司 安捷伦 Rev.A.09.0l 化学工作站 五氟