自组装表面等离子体子共振传感器用于测定抗生素-蛋白结合率的研究.pdfVIP

VOI. 27 高 等 学 校 化 学 学 报 NO. 6 2 0 0 6 年 6 月 CHEMICAL JOURNAL OF CHINESE UNIVERSITIES 1028 ~ 1031 自组装表面等离子体子共振传感器 用于测定抗生素!蛋白 结合率的研究 邹向宇，周建光，谢 萍，张 磊，汪淑华，冯国栋，金钦汉 （吉林大学化学学院微分析仪器研究所，吉林省光谱分析仪器工程技术研究中心，长春 130023） 摘要 自行设计组装了一套以白色发光二极管为光源的新型表面等离子体子共振传感器，并采用此传感器 通过测量动力学参数测定了 8 种抗生素与固定在金膜上的牛血清白蛋白之间的结合率，将所得数据与常用 的平衡透析法进行了比较，两者具有良好的可比性和线性相关性，说明采用此法也可测定抗生素与蛋白的 结合率. 该方法具有测定周期短、样品用量少、操作简便、预测效果良好以及仪器易于小型化甚至微型化等 优点. 关键词 表面等离子体共振传感器；抗生素；蛋白；结合率 中图分类号 O657 文献标识码 A 文章编号 0251-0790（2006）06-1028-04 药物与蛋白的结合程度是药物代谢动力学研究中的一个重要内容，它直接影响血液中的药物浓 度、药物的药理作用及临床效果. 对于抗菌素类药物，蛋白与药物的结合程度往往直接关系到药物的 抗菌作用，所以其研究已引起人们的重视. 在药物代谢动力学中，这种结合的程度常用结合率来表示. 蛋白与药物的结合率研究分为体内研究和体外预测两种方法. 由于体内试验很费时，而且有些药物几 乎不可能作体内结合率试验，因此，在药物与蛋白的结合率研究中，多采用体外试验方法进行预测. 常用的体外试验预测结合率的方法有平衡透析法、高速离心法和过滤法等，其中平衡透析法［1］的预测 效果最好，应用最广泛. 但平衡透析法的操作繁琐，测量周期长（测定一种药物一般需要 3 ~ 4 d），且 药物用量较大（一次测定所需的蛋白与药物总量一般都在 10 mL 以上）. 在药物研发领域中，人们越来越重视对药物与蛋白作用情况的研究，因为它是药物药理作用乃至 临床效果的重要指标. 因此，研究开发新的能够快速测定药物蛋白结合率的方法具有重要的意义. 研 究表明，利用表面等离子体共振（SPR）技术研究药物与蛋白的作用情况具有不需标记和检测快速的优 ［ ］ ［ ］ 点，并在药物与脂类 2 、蛋白 3 ~ 5 相互作用等研究方面取得了一定的成功. 但所用的仪器都较复杂， 采用激光或钨灯作为光源，价格昂贵，也难于小型化. 我们利用 SPR 技术可以检测分子间相互作用的 原理，自行组装了一套以白色发光二极管为光源的 SPR 装置，并将其用于研究蛋白分子与药物分子的 相互作用情况，通过测定反应的热力学常数，进一步求出了几种抗生素药物与蛋白的结合率. 结果表 明，该方法具有测定周期短（测定一种药一般小于 1 h）、药物用量少、操作简便、预测效果良好、所用 仪器装置元器件简单、廉价和易得、利于小型化等优点，具有较好的推广应用前景. # 实验部分 . # 仪器与试剂 白色发光 二 极 管（ EvedIight eIectdOnics CO. Ltd. ，中 国 台 湾），自 制 流 通 池（180 !L），光 纤 和 HR2000CG 小型光谱仪（美国 OceanOpti