多子小瓜虫HSP70基因ORF的克隆及表达分析.pdfVIP

第 ??卷第 ?期? 大 连 海 洋 大 学 学 报? ?????????．?? ???????年 ?月? ?????????????? ???????????????????? ???．?????? ??????．????／?．????．????— ????．????．??．???? 文 章 编 号 ：?????????????????一????一??? 多子 小 瓜 虫 ?????基 因 ???的克 隆及 表 达分 析? 夏润林? ，潘厚军?，赵飞?，方翔?，石存斌?，李华?，吴淑勤? ??．大连海洋大学 水 产与生命学院 ，辽宁 大连 ??????；?．中国水产科学研究院珠江水产 研究所 农业部渔用药物创制重点实验室? 广东省水产动物免疫技术重点实验 室，广东 广州 ???????? 摘要 ：热激蛋白 ?????是生物适应环境温度变化的重要媒介分子，本试验中克隆了多子小瓜虫?????????．? ??????????????????????? ??????????基 因的 ???，采用荧光定量 ??—???法 ，在水 温为 ??、??、??℃的条? 件下检测 了 ?????基 因在 多子 小 瓜虫 幼 虫 、滋 养 体 和包 囊 ?个 不 同发 育 阶 段 的表 达 情况 。结 果表 明 ：? ????????基因 的 ???为 ???????，预测编码为 ??????；????????蛋 白的二级结构主要 以?一螺旋和无 规卷 曲? 为主 ，空间构型包括 ?端 ??????功能域和 ?端多肽结合 功能域 ；与其他物种 ?????蛋 白序列 进行 同源 性? 比较发现 ，????????与螅 状独缩虫 ?????????????????????????的同源性 最高 ，为 ??．??％ ；????????与分? 类地位 同为纤 毛门???螅状独缩虫 、嗜热 四膜虫 ???????????????????????、变藓棘毛虫 ??????????????????????????? 的 ?????聚在一个分支 ；?种温度下 幼虫 的 ?????表达量均最低 ，??℃和 ??℃时 ，?????基 因在滋养 体? 中的表达量显著高于幼虫和包囊 ????．???，而 ??℃时 ，?????基 因在包囊 中的表达量显 著高于滋养体 和? 幼虫 ????．???；?????时 ?????基 因在包囊 中的表达量显 著高于 ??℃ ????．???。研究表 明 ，试验所 用? 多子小瓜虫 的 ?????基 因在 ??℃ 时仍 大量 表 达 ，且 能感 染试 验鱼 ，推测 该 虫株 为热 带 型 多子 小 瓜虫 ，? ?????基 因在多子小瓜 虫对 抗外 界高温环境 中可能发挥着重要的作用 。? 关键 词 ：多子小瓜虫；热激蛋白?????????；基因表达? 中图分 类号 ：????? 文献标 志码 ：?? 多 子小 瓜 虫 ??????????????????????????是 一 种 能? 在 ??℃左 右水 温时多 子小 瓜虫 仍能 大量感 染草 鱼 。? 感染淡水鱼类 的重要纤毛虫 ，主要寄生于鱼的体表? 因此 ，揭示 在高 温环 境 中多子小 瓜虫 感染 和存 活 的? 和鳃 ，引起