分子生物学实验课件2.pptVIP

分子生物学实验;目的：掌握分子生物学基本技术，主要包括RNA提取、反转录、PCR、电泳等 内容：罗非鱼18S基因的cDNA克隆 总RNA提取 电泳检测 cDNA合成 PCR扩增 PCR产物的分离、回收和纯化 ;时间安排： 5月24日 实验准备一：1.3去除RNA酶的实验用品处理 5月25日 实验准备二：灭菌干燥离心管、枪头 5月26日 总RNA提取和电泳检测 5月27日 cDNA合成和PCR扩增 5月28日 PCR产物回收和纯化;要求： 1、分组实验，以小组为单位进行考核，即以各小组实际的实验结果进行评分，不另外安排考试。 2、实验结果主要包括：总RNA电泳图、PCR电泳图，每小组交一份实验报告，实验报告需对实验结果进行分析讨论。;1 材 料 1.1 实验鱼 罗非鱼购自农贸市场，碎冰速冻麻醉后分离垂体、肝脏组织，立即置于TRIZOL试剂，或置于-60℃超低温冰箱保存。 1.2 试 剂 柱式动物RNAout（总RNA 提取试剂盒） RevertAid TM H Minus First Strand cDNA Synthesis Kit（反转录试剂盒） ExTaq PCR kit（PCR反应试剂盒） E.Z.N.A Gel Extraction Kit（胶回收试剂盒） 100bp DNA Ladder ;1.3 去除RNA酶的实验用品处理 DEPC水：每1L双蒸水中加入1mL