超声波法和超声波酶法提取灵芝多糖的条件研究.PDFVIP

食用菌学报 ? 2006. 13(1):48～ 52 文章编号 :1005 - 9873(2006)01 - 0048 - 05 超声波法和超声波酶法提取灵芝多糖的条件研究 郑 　静 , 常 滔* , 林 　英 , 程 　晖 (农业部北方农作物病害免疫重点开放实验室 ;沈阳农业大学植保学院 , 沈阳 110161) 摘 　要 :采用单因子分析和正交试验 , 以灵芝提取物中多 糖提取率和多糖含量为指标 , 分别对 超声波法 和超 声波 协同纤维素酶法中影响多糖提取效果的主要 因素进行 研究 。 结 果表明 , 超声 波酶法 中各因 素对灵芝 多 糖提取率的影响程度依次为酶解温度 , pH , 酶解时间和酶量 。 最佳提取条件是酶解 温度 50 ℃, pH 6. 0 , 酶量 2. 0 %(%对底物), 酶解时间 20 min 。 该方法与超声波法相比 多糖提 取率稍 低 , 但 提取物 中多糖 含量??对 高 出 20 %以上 ;此外 , 该方法还能缩短提取周期 , 是 1 种值 得借鉴的提取灵芝多糖的方法 。 关键词 :灵芝 ;多糖 ;超声波 ;纤维素酶 ;正交试验 中图分类号 :S567. 310. 99　 　　　文献标识码 :A 　　灵 芝(Ganoderma lucidum )是 我 国传 统中 维素酶为上海东风生化技术有限公司产品 ;主要 药 , 具有滋补强壮 , 扶正固本的作用[ 1] , 至今已有 化学试剂均 为沈阳 市化 学制剂 厂生产(纯度级 2000 多年的使用历史 。 灵芝子实体多糖是重要 别 AR)。 的有效成份之一 , 被广泛用作药品及保健食品的 1. 2 试验方法 原材料 。 常用的灵芝多糖提取方法有煎煮法 、水 1. 2. 1 脱低聚糖 　　 蒸馏法等 , 但这些方法耗时长 、提取率低 、提取物 　　每次称取灵芝子实体粉200 g , 按料液比 1 ∶3 中多糖含量相对较低 。 加入 80 %乙醇 600 mL , 85 ℃回流 6 h , 滤出溶剂 , 灵芝子实体的主要构成成分是纤维素 、半纤 按同等比例加入乙醇 , 进行回流 , 如此重复 3 次 , 将 维素和木质素 , 三者之间通过形成束状晶体结构 滤渣烘干保存 , 作为多糖提取试验的原料 。 或产生木质素的结合层 , 使灵芝子实体具有较强 1. 2. 2 多糖含量的测定 　　 的硬度 , 而灵芝多 糖存在于子实体的 细胞壁中 , 多糖测定采用苯酚 - 硫酸比色法[ 2] 。 由于子实体结构紧密 , 致使灵芝多糖的提取时间 多糖含量 =(溶液中多糖浓度 ×溶液体积) 过长和提取不完全 。近年来 , 人们采用超声波技 /粗提物质量 ×100 % 术提取植物 、真菌中的活性物质取得了很好的效 1. 2. 3 多糖提取率公式 　　 果 , 但是采用超声波技术结合纤维素酶提取真菌 　　多糖提取率 =粗提物质量 /原料质量 多糖的报道很少 。 为了验证此方法的提取效果 , ×100 % 本试验采用正交试验设计法优 化超声波协同纤 1. 2. 4 超声波法提取灵芝多糖的单因素试验