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DNA重组技术的工具学案.doc
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DNA重组技术的工具学案
知识回顾
DNA含有指导生物体生命活动的 ,每个DNA分子包含着成百上千个基因,基因控制
着 的合成。研究证实,传密码在动物、植物和微生物之间是 的。
DNA的基本组成单位是 ,它包含3部分分别
是 、 、 。在右侧画出由A、T、G、C
四种碱基组成的四种核苷酸组成的DNA分子的平面结构图,并
说出DNA分子结构的特点:
①
②
③
预习导学
一、基因工程概念
1、概念:基因工程又是指按照人们的意愿,进行严格的设计,并通过体外______________和_________________等技术,赋予生物以新的_______________,从而创造出更符合人们需要的新的_______________和________________。由于基因工程是在_____________________上进行设计和施工的,因此又叫做_____________。
2、理解:操作环境: ;操作对象: ;操作水平: ;基本过程___________________________________________实质:_______________;结果: __________________。
二、DNA重组技术的基本工具
1、“分子手术刀”——__________________________
⑴来源:主要是从________________________________来的。
⑵作用:能够识别双链DNA分子的某种____________________________,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的__________________________断开。
⑶结果:经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式:_______________和________。
2、、“分子缝合针”——_________________________
连接酶
来源:_____________
作用:只能“缝合”具有_____________双链DNA片段
T4DNA连接酶
来源:_____________________
作用:既可以“缝合”双链DNA片段互补的__________,又可以“缝合”双链DNA片段的____________
⑴种类
作用结果:恢复被______________________切开的两个核苷酸之间的_______________,拼接成新的DNA分子。
3、“分子运输车”——___________________________________
⑴种类:_______________、 ____________________、 _________________
⑵载体具备的条件
能够在受体细胞中进行______________,或整合到__________________上,随染色体DNA进行同步复制。
有一个或多个___________切割位点,共外源基因插入。
具有特殊的________________________,共重组DNA的鉴定和选择。
疑难解析
1、比较有关的酶
(1)DNA水解酶:能够将DNA水解成4种脱氧核苷酸,彻底水解成磷酸、脱氧核糖、四种碱基.
(2)DNA解旋酶:作用的部位是氢键,结果是DNA双螺旋打开,形成DNA单链。注意:使DNA解成两条长链的方法除用解旋酶以外,在适当的高温(如94℃)、重金属盐的作用下,也可使DNA解旋。DNA解旋酶用于DNA分子的复制与杂交。
(3)DNA聚合酶:能将单个的核苷酸通过磷酸二酯键连接成DNA长链。用于DNA分子的合成。
(4)DNA连接酶:是通过磷酸二酯键连接双链DNA片段的缺口。用于基因表达载体的构建。 ⑸ 限制酶:使双链DNA分子的特定部位的磷酸二酯键断开,用于提取目的基因和切割载体。
2、DNA连接酶与DNA聚合酶作用的比较
DNA连接酶DNA聚合酶不同点作用对象双链DNA片段单个脱氧核苷酸连接成一条与模板链互补的DNA单链模板不需要模板需要DNA一条链为模板作用结果形成重组DNA分子形成新的DNA分子相同点作用实质都是
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