正交试验法优化香附总黄酮提取工艺的论文.docVIP

　　正交试验法优化香附总黄酮提取工艺的论文 【摘要】 目的优选香附总黄酮的提取工艺。方法 以乙醇体积分数、料液比、提取时间、提取次数为考察因素，以总黄酮含量为测定指标，采用正交试验优化香附总黄酮的最佳提取工艺。结果 香附总黄酮的最佳提取工艺为乙醇体积分数70%、料液比1∶15、提取时间45 min、提取次数为2次。结论 该提取工艺稳定，适合香附总黄酮的提取。 【关键词】 香附;总黄酮;正交试验;提取工艺 　abstract:objectiveto optimize the extraction technology of total flavonoids from cyperus rotundus. methods orthogonal experiment aterial and solvent,extracting time and frequency as factors.results the optimal extraction technology aterial to solvent of 1∶15,extracting for 45 min and 2 times.conclusion the extraction technology is steady and suitable for extracting total flavonoids from cyperus rotundus. 　　key ent; extraction technology 　　香附为莎草科多年生草本莎草(cyperus rotundus l.) 的干燥根茎，性辛、微苦、微甘、平,归肝、三焦经，具有疏肝理气、调经止痛的功效[1]。.香附主要含有挥发油、黄酮类化合物、三萜类化合物、甾醇类、生物碱、糖类、酚类等化学成分[2]。现有研究已证明黄酮类化合物在治疗冠心病、老年性痴呆、脑血栓、神经系统疾病等方面有显著效果，还具有抑菌、抗癌等作用，且无副作用，已开发出许多种药品和保健食品[3-5] 。已有的文献资料未见有关香附黄酮类物质提取工艺的研究报道，故本试验对香附总黄酮的提取工艺以及含量进行初步研究，为香附总黄酮的进一步研究开发提供资料。 　　1仪器与试药 　　1.1仪器 　　agilent8453e型紫外-可见分光光度计(美国安捷伦公司);bp211d电子分析天平(德国sartorius);kq-500超声仪(昆明市超声仪器有限公司，功率500 ×14 cm)。 　　1.2试药 　　香附药材购自安徽亳州药材市场，经湖北医药学院附属人民医院药学部雷龙副教授鉴定为莎草科植物(cyperus rotundus l.) 的干燥根茎;芦丁对照品(批号：10080-200306)购自中国药品生物制品检定所;聚酰胺(30～60目，浙江省台州市路桥四甲生化塑料厂);水为重蒸水;其余试剂均为分析纯。 　　2方法与结果 　　2.1供试品溶液的制备 　　取香附粉末(过2号筛)3.0 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加石油醚(60~90 ℃)50 ml，超声提取30 min，弃去石油醚液，待样品中残留的石油醚全部挥去后，按实验要求加入不同体积乙醇(不同体积分数)超声提取不同时间、次数，放凉后滤过，滤液置80 ℃水浴锅上浓缩至适量。称取聚酰胺3 g，以样品溶液拌样后置80 ℃水浴锅上加热至无醇味，装入层析柱中。用蒸馏水100 ml、20%(体积分数)乙醇50 ml、60%(体积分数)乙醇300 ml依次进行洗脱，收集60%(体积分数)乙醇洗脱液，置水浴锅上浓缩，用60%(体积分数)乙醇定容至25 ml，即得。 　　2.2对照品溶液的制备 　　精密称取已干燥至恒重的芦丁对照品20.08 mg，置10 ml容量瓶中，加60%(体积分数)乙醇溶解至刻度，摇匀，即得。 　　2.3测定波长的选择 　　取供试品溶液和对照品溶液各1 ml，置于10 ml容量瓶中，加入5%(质量浓度)nano2 溶液0.3 ml，摇匀，放置6 min，再加入10%(质量浓度)al(no3)3溶液0.3 ml，摇匀，再放置6 min，加入4%(质量浓度)naoh溶液4 ml，加60%(体积分数)乙醇定容到10 ml，放置15 min，即得。用紫外分光光度计进行扫描，结果两者在499.9 nm处均有最大吸收，故选择500 nm作为测定波长。 　　2.4线性关系考察 　　分别精密量取芦丁对照品溶液0.2、0.5、1.0、1.5、2.0 ml置25 ml容量瓶中，按照“2.3”项下自“加入5%(质量浓度)nano2 溶液0.3 ml ”起进行操作，于500 nm处测定其吸光度。以吸光度(a)为纵坐标，芦丁质量浓度(ρ)为横坐标进行线性回归，得回归方程为a=27.455ρ+0.018 7，r=0