专题2 ：微生物培养与应用.pptVIP

课题2 微生物的分离与计数; 1.在培养基的配方中，为微生物的生长提供碳源和氮源的分别是是什么物质？;（一）筛选菌株 自然界筛选：根据它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。(如耐高温的TaqDNA聚合酶) 实验室筛选：人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度、pH等），同时抑制或阻止其他微生物生长。 选择培养基：在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。目的是从众多微生物中分离所需要的微生物。 ;测定微生物数量的方法： 1、直接计数法：最常用的显微镜直接计数。 先将待测样品制成悬液，然后取 一定量的悬液放在显微镜下进行计数。根据在显微镜下观察到的微生物数目来计算出单位体积内的微生物总数。 优点：设备简单、能观察微生物的形态特征。 缺点：不能区分死菌和活菌； 难以计数微小的细菌。 一般用于纯培养悬浮液中各种单细胞菌体的计数。 ; 2、间接计数法：最常用稀释涂布平板计数法 应用：统计样品中活菌的数目 ;;阅读教材22-23页小字部分并帮A同学解决问题;1.原理：尿素是一种重要的农业氮肥，只有当土壤中 的 细菌将尿素分解成氨之后，才能 被植物利用。尿素细菌能合成脲酶，在脲酶的作用下尿素被分解成氨。 CO(NH2)2+H2O CO2+2NH3 ;（2）实验设计的内容包括实验方案、材料用具、实施步骤和时间安排等。 （3）实验流程： 土壤取样 样品系列稀释 涂布平板与培养 观察并记录结果; ;3、 培养不同微生物往往需要不同培养温度。 细菌一般在（ ）培养1～2d， 放线菌一般在（ ）培养5～7d， 霉菌一般在（ ）的温度下培养3～4d。 4、 在菌落计数时，每隔24h统计一次菌落数目。选取菌落数目稳定时的记录作为结果，以防止因培养时间不足而???致遗漏菌落的数目。 点评：菌种中有些菌体增殖快，有些菌体增值慢，所以培养时间要充足，使得每个菌体都能形成肉眼可观察到的菌落。 5、菌落的特征包（ ）等方面。;（1）　对分离的菌种作进一步的鉴定，还需要借助 生物化学 的方法。 (2)　在细菌分解尿素的化学反应中，细菌合成的( )将尿素分解成了( )。氨会使培养基的碱性 增强 ，PH( )。因此，我们可以通过( )来判断该化学反应是否发生。 (3)　在以 尿素 为唯一氮源的培养基中加入( )指示剂。培养某种细菌后，如果PH升高，指示剂将变( )，说明该细菌能够( )。 ;四、课堂总结、点评;; 3.（09安徽卷）下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述，其中错误的是 A.用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板 B.取104、105 、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1ml，分别涂布于各组平板上 C.将实验组和对照组平板倒置，370C恒温培养24-48小时 D.确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数;;;编号;（3）若除去成分②，加入（CH2O），该培养基可用于培养 。 （4）表中营养成分共有 类。 （5）不论何种培养基，在各种成分都溶化后分装前，要进行的是 。 （6）右表中各成分重量确定的原则是 。 （7）若右表培养基用于菌种鉴定，应该增加的成分 。