益肾活血清利方对单侧输尿管梗阻大鼠肾组织中ED1及NF.docVIP

　　益肾活血清利方对单侧输尿管梗阻大鼠肾组织中ED1及NF 作者：孙世竹 孙伟 王继明 ,陈继红 ,赖仁胜 朱萱萱 【摘要】 目的 探讨依据益肾活血清利法组方对uuo(单侧输尿管梗阻大鼠模型)大鼠的肾间质中ed1及nf-κb表达的影响。方法 制备单侧输尿管梗阻大鼠模型，随机分为假手术组、模型组、益肾活血清利方组、益肾活血清利方高剂量组、苯那普利组。观察对术后21天大鼠肾间质ed1及nf-κb表达的影响。结果 中药各组较模型组大鼠肾间质ed1及nf-κb的表达差异均有显著性;苯那普利组对ed1的表达与模型组比较差异有显著性。结论 益肾活血清利方对肾间质纤维化过程中ed1及nf-κb表达具有良好的防治作用，苯那普利组可以抑制uuo大鼠肾间质ed1的表达。 【关键词】 益肾活血清利方;单侧输尿管梗阻(uuo);ed1(巨噬细胞);nf-κb(核转录因子) [abstract]objective to identify portant role in vivo in preventing the development of tubulointerstitial fibrosis after unilateral ureteral obstruction in rats.methods to establish the uuo model in vivo，the rats ly divided into five groups：sham opermion group， model group，the yishen huoxue qingli chinese medicine group，the high dosage chinese medicine group and the benazepril group.after 21 days the expression of ed1 and nf-κb munohistochemistry. result the expression level of ed1 and nf-κb in the uuo group edicine group(plt;0.01),the high dose chinese medicine group, and the benazepril group is gradually loedicine group plays a remarkably preventive role (plt;0.01)，the benazepril group is not significant.the high dose chinese medicine group can decrease the expression of nf-κb;conclusion yishen huoxue qingli recipe could reduce the expression of ed1 and nf-κb in mace kidney ace kidney. 　　[key l含生药1g (低剂量)、2g(高剂量)，由江苏省中医院制剂室制备。盐酸苯那普利(洛汀新)由北京诺华制药有限公司生产，市售。 　　1.3 实验仪器 leica光学显微镜(型号：dm ls2)。 　　1.4 实验试剂 ed1一抗为鼠抗鼠巨噬细胞ed1(cd68)单克隆抗体，chemicon international (a serological cpany)，美国。nf-κb一抗为核转录因子nf-κb单克隆抗体，二抗为辣根过氧化酶(hrp)标记的链菌素抗生物素igg (hrp-polymer goat anti-ms/rb igg)，福州迈新生物技术开发有限公司。磷酸盐缓冲液pbs、dab显色液，均为福州迈新生物技术开发有限公司。 　　2 方法 　　2.1 造模及给药方法 将40只大鼠随机分为假手术组、模型组、益肾活血清利方组、益肾活血清利方高剂量组(2ml/100g)、苯那普利组(45mg/kg)，提前1天给药，每天2次灌胃。以2%戊巴比妥钠30mg/kg腹腔注射麻醉大鼠，行左侧输尿管结扎术[1]。无菌手术打开腹腔，分离右侧输尿管, 在肾盂处和输尿管上1/3处用3号线双重结扎输尿管，分层缝合关闭腹腔;假手术组仅将输尿管游离但不结扎。术后21天称重后处死大鼠，留取梗阻侧肾脏标本，置于10%中性甲醛固定液中保存，用以作有关病理检查。 　　2.2 肾组织标本ed1及 nf-κb免疫组化检查 免疫组化在江苏省中医院病理科进行。采用改良sp法：(1)脱蜡修复液修复10min，微波450in，自来水冷却，pbs洗3次，各2min。(2)加羊血清孵育10min，加第一抗体，室温1h，pbs洗3次，各2min。(