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穿山甲与猪蹄甲的化学成分比较的论文.doc
穿山甲与猪蹄甲的化学成分比较的论文
【摘要】 目的对穿山甲(i)和猪蹄甲(ii)的成分进行比较。方法用薄层层析法、紫外分光光度法,氨基酸分析仪对i、ii水解液、水提液及醇提液的成分及氨基酸进行测定比较。结果①两者水提液、醇提液的薄层斑点颜色和rf 值相同;②紫外吸收峰峰形基本一致;③所含氨基酸一致,除个别氨基酸含量差异明显,其它氨基酸含量接近。结论猪蹄甲和穿山甲的提取物中所含成分相似且含量接近,这为猪蹄甲代替穿山甲药用提供了理论依据。
【关键词】 穿山甲 猪蹄甲 薄层层析 紫外分光光度法 氨基酸
穿山甲的鳞甲,临床用于 治疗 痈疽疮肿、风寒湿痹、月经停闭、乳汁不通,外用止血[1],并有明显的抗肿瘤作用,用于妇科卵巢肿瘤效果显著[2];猪蹄甲临床用于治疗痔疮、疽咳嗽喘息及通乳、补血等[3]。此外,民间有将??蹄甲煅成炭后口服以治疗功能性子宫出血症的[4]用法。
穿山甲是国家二级保护动物,其鳞甲为常用的贵重中药材。由于用量不断增大,野生资源已临灭绝,市场供需矛盾非常突出,因而,很有必要寻找新资源予以代用。据临床报道,猪蹄甲可代替穿山甲[5,6]使用,《本草纲目》记载了穿山甲与猪蹄甲作用疗效有相同之处,均可治痈疽、恶疮、痔漏、除痰化痰等。本文对穿山甲和猪蹄甲的水和70%乙醇提取物进行了薄层、紫外线及氨基酸含量等的分析,结果发现,两种提取物斑点颜色和rf值基本相同;此外吸收峰形基本一致,含氨基酸的类型及含量也基本相同。.现报道如下。
1 材料及仪器
穿山甲(已炮制,购于南昌中药切制厂),猪蹄甲(已炮制,购于南昌肉类加工厂)。仪器:三用紫外线分析仪(海顾村电光仪器厂),日立835-50型氨基酸自动分析仪,721型可见分光光度计(上海第三分析仪器厂)。所有试剂均为a.r级。
2 方法与结果
2.1 检测液的制备
2.1.1 水解液的制备
称取穿山甲(i)粉末50.0 g,加入6 mol/l的hcl 250 ml,回流48 h[7],将水解液置于水浴上加热挥去hcl,取出加入活性炭,趁热抽滤,浓缩,定容,摇匀,灌装,密封,高温灭菌,备用。
称取猪蹄甲(ii)粉末50.0 g,加入6 mol/l的hcl 250 ml,同穿山甲水解液的制备,得猪蹄甲水解液。
2.1.2 醇提液的制备
称取i粉末30.0 g,加入70%乙醇240 ml[8],回流1 h,趁热抽滤,滤液浓缩到一定量,定容(50 ml),摇匀,灌装,备用。
称取ii粉末30.0 g,照上法制得醇提液。
2.1.3 水提液的制备
称取i粉末20.0 g加入蒸馏水200 ml,煎煮1 h,抽滤,滤渣中再加蒸馏水200 ml,煎煮1 h,抽滤,合并两次滤液,浓缩,定容,摇匀灌装,密封后高温来灭菌,备用。
称取ii粉末20.0 g,照上法制得水提液。
2.2 薄层分析
2.2.1 层析板的制备玻璃规格
厚2 mm左右,光滑清洁,2 cm×10 cm或4 cm×20 cm。
铺板:硅胶g300 g,加入0.7%cmc-na上清液60 ml,研钵中研成均匀糊状,立即铺层,凉干,105℃活化1 h,干燥器中备用。
2.2.2 点样液的制备
将以上i、ii醇提液、水提液各取40 ml浓缩至10 ml,装入小锥形瓶中塞紧备用,水提液置冰箱中保存。
2.2.3 点样
分别用微量进样器取上述i、ii醇提液的浓缩制品15 ml,点样于硅胶g板上,分别以a、b、c 3种不同溶剂系统展开[8],结果见图1~3。
a溶剂系统:
展开剂 正丁醇(水饱和液)∶无水乙醇 (3∶1)
显示剂 5%茚三酮无水乙醇液
各点rf值
1i=0.147 1ii=0.147
2i=0.224 2ii=0.224
3i=0.345 3ii=0.349
4i=0.457 4ii=0.448
5i=0.741 5ii=0.716
6ii点为绿色,其它各荧光点均为淡紫色。
b溶剂系统:
展开剂 正丁醇∶乙醇∶nh3·h2o(4∶1∶1)
显色剂 5%茚三酮无水醇液
各点rf值:
1i=0.0822 1ii=0.0822
2i=0.219 2ii=0.218
3i=0.279 3ii=0.283
4i=0.627 4ii=0.630
5i=0.977 5ii=0.977
5i、5ii、6ii为紫色点,其它各荧光点均为黄绿色。
由以上数据可看出,i、ii醇提液或水提液在不同溶剂系统下展开后,其相应各点rf 值基本相同,荧光点的颜色也基本一致,说明二者成分基本相同。在上述两种提取液的薄层层析中,有一明显现象是ii 的斑点颜色和荧光点亮
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