血管性血友病因子体外对胃癌细胞BGC823增殖和黏附的影响的论文.docVIP

　　血管性血友病因子体外对胃癌细胞BGC823增殖和黏附的影响的论文 【摘要】 目的 研究血管性血友病因子（von tt）法检测细胞增殖活性和细胞黏附能力的变化；用倒置显微镜观察细胞形态学变化。 结果 vtt黏附实验结果显示van gastric cancer cell line bgc823 in vitro in, zhang hong, yang aijun, liu in institute of pathology, school of basic medicine, lanzhou university, lanzhou 730000, china corresponding author: li min, email: limin0606@163.abstract：objective to investigate the effect on proliferation and adhesion of van gastric cancer cell line bgc823 in vitro, and to clarify its probable mechanism. methods human gastric cancer cell line bgc823 cultured in vitro tt colorimetric assay. the cell morphological changes icroscope. results veand concentrationdependent manner. significant cytotoxicity of vorphology. pared ent orphological change in vitro, vportant part in the progress of adhesion on the bgc823 cells. key i1640（美国gibco公司）；胰酶（美国amresco公司）；超级新生牛血清（fbs）（杭州四季青生物工程有限公司）；ⅳ型胶原，兰州大学病理研究所自制；四甲基偶氮唑蓝 （mtt）及牛血清白蛋白（bsa）（美国sigma公司）；兔抗人v公司）；人胃癌细胞株bgc823购于中国科学院上海细胞生物研究所，经预实验检测显示能够表达vi1640 培养液（含100ku/l青霉素, 100ku/l链霉素）在37℃、 5％ co2及饱和湿度的培养箱中维持培养。 1.3 mtt法测定vl的密度接种于96孔板中，同时每孔加vl，每个浓度平行3孔，对照组加入等体积培养液，置co2培养箱培养。分别于24、48、72h后取出96孔板，弃上清，加200μl／孔无血清rpmi1640及20μl／孔mtt，4h后弃上清，加200μl／孔二甲基亚砜（dmso）震荡10min混匀，待溶解完全后用酶标仪測a570值。细胞增殖抑制率计算公式如下：细胞增殖抑制率（ir％）＝（1－实验组a570／对照组a570）×100％。 1.4 细胞形态学观察 bgc823细胞以5×104／孔的密度接种于6孔培养板内，对照组无干预，常规培养；处理组在培养基中加入vl；每组3个复孔。24、48、72h时分别于倒置显微镜下观察细胞形态及生长状况。 1. 5 黏附抗体抑制实验 将vl）加于rpmi1640培养基中，与bgc823细胞共培养48h；将96孔板预先分别用3g／ml及1.5g／ml ⅳ???胶原20μl／孔包被，2％ bsa封板处理，加入调好的细胞悬液200μl／孔（5×105／ml）；co2培养箱分别孵育30、60、90、120min后，弃去培养液，pbs冲洗除去未黏附细胞；弃pbs后加入mtt 20μl，及无血清rpmi1640 200μl，co2孵育3h；吸弃培养孔内上清液，加入dmso 200μl溶解，噻唑兰显色，酶联免疫检测仪570nm测各孔吸光度（a570）值，同时设立相应的rpmi1640培养对照组。各组重复3次。 1.6 统计学方法 采用spss 11.5统计软件进行分析。计量资料以±s表示，组间差异比较采用方差分析和kruskaltt法检测结果显示bgc823细胞的生长受到明显的抑制，随着作用时间延长，抗体浓度增大，增殖抑制率增加，表明抑制作用与浓度和作用时间均呈明显的依赖关系，见表1。表1 vin），bgc823细胞在ⅳ型胶原上的黏附增加（p＜0.01），差异有统计学意义；va von etastasis colorectal carcinoma[j]. . deficient activity of von inated malignancies[j]. cancer res,