不同免疫佐剂对丙肝核酸疫苗效果的论文.docVIP

　　不同免疫佐剂对丙肝核酸疫苗效果的论文 【摘要】 目的：观察不同佐剂对hcvdna疫苗效果的影响。方法：雌性balb/c小鼠分别用脂质体ddab/epc和dcchol/dope、montanide isa 720和氢氧化铝为佐剂的hcvdna疫苗免疫3次，elispot法观察脾淋巴细胞受hcv核心、e2、e1/e2、ns3和ns5b蛋白刺激后细胞因子的产生。结果：ddab/epc组产生ifnγ较多，在大部分情况下，显著高于其它组。该组il2的产生也显著高于其它4组。该组il4的产生，在某些情况下也高于其它组。用ns5b刺激，氢氧化铝组il4的产生显著高于其它4组(plt;0.05)。裸dna和两种脂质体组ifnγ的产生高于il4，而montanide和氢氧化铝组il4的产生高于ifnγ。结论：在4种佐剂中，ddab/epc效果最好，montanide和氢氧化铝可将dna疫苗th1为主的免疫特性转换为以th2为主。 【关键词】 核酸疫苗 丙型肝炎病毒 免疫佐剂 　　immunological effects of different adjuvants on hcvdna vaccine 　　jin bo, richard yanhui es ent of digestive diseases, naval general hospital, beijing 100037, china 　　［abstract］ objective:the immunological effects of hcvdna vaccine ice.methods:female balb/c mice ed e ddab/epc or dcchol/dope, hcvdna mixed ontanide isa 720 or aluminum hydroxide, respectively, and boosted tost cases, splenocytes from mice vaccinated e produced more ifnγ. these splenocytes also have significant higher il2 production pared alum group have significance in il4 production pared ed il4 in naked dna, ddab/epc, and dcchol/dope groups ounted ifnγ in alum and montanide groups.conclusion:encapsulation e ddab/epc has the strongest adjuvant effect in inducing th1 dominated immunity. alum and montanide can convert the th1 nature of dna vaccine to th2biased immunity. 　　［key munologic adjuvants 　　丙型肝炎病毒(hepatitis c virus, hcv)感染是一个严重的全球性健康问题。.cOm据世界卫生组织在1999年的调查结果表明，全世界有大约一亿七千万人感染丙型肝炎病毒，占全世界人口总数的3%［1］。 　　在丙型肝炎病毒感染后，虽然机体可以产生很强的体液免疫反应，但仍有75%～85%的急性丙型肝炎病毒感染者不能清除病毒而成为慢性感染者。抗hcv的中和抗体虽然在一定情况下有助于病毒的清除, 但由于丙型肝炎病毒在患者体内可以不断发生演变，从而产生对中和性抗体有抗性的突变株。 　　因此, 虽然有hcv的中和抗体存在，但细胞免疫反应在防止和清除hcv感染过程中显得更为重要。因此，诱导产生针对hcv的特异性细胞免疫反应就不可避免地成为hcv疫苗研究的重点［2］。 　　dna疫苗可诱导以i型辅助性t细胞(t helper cell type ⅰ, th1)介导的细胞免疫。为观察不同类型免疫佐剂对hcvdna疫苗免疫效果的影响，我们比较了小鼠接种几种不同佐剂辅佐的hcvdna疫苗后免疫反应的改变。 　　1 材料与方法 　　1.1 hcvdna重组质粒的构建 将hcv1a型h株核心、e1、e2蛋白基因(1～746位氨基酸，核酸342～2 579)插入pvax1质粒(美国invitrogen corp.)bamh ⅰ限制酶切点，转化大肠杆菌增殖，用endofree plasmid giga kit(美国qiagen)纯化。将重组质粒转染chok1细胞，裂解细胞做h ⅰ位点，转化大肠